| 人MR1/IgG1 Fc二聚体融合蛋白的构建、表达及功能检测 |
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| 引用本文： | 赵桂华,龚业莉,翁秀芳.人MR1/IgG1 Fc二聚体融合蛋白的构建、表达及功能检测[J].华中科技大学学报(医学版),2023(5):649-655. |
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| 作者姓名： | 赵桂华 龚业莉 翁秀芳 |
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| 作者单位： | 1. 江汉大学医学部免疫学教研室;2. 华中科技大学同济医学院基础医学院免疫学系 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（No.32170920）； |
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| 摘 要： | 目的 构建MR1/IgG1 Fc融合蛋白杆状病毒表达载体并使其在昆虫细胞内表达获得MR1/IgG1 Fc二聚体，制备人工抗原提呈细胞用于黏膜相关恒定T细胞(MAIT)反应性代谢物及MAIT细胞功能调控研究。方法 从人外周血单个核细胞中扩增β2m编码基因。商业化合成MR1胞外段和IgG1 Fc融合基因的全序列基因MR1/IgG1 Fc,与β2m基因重组构建pFastBacTM Dual+β2m+MR1/IgG1 Fc]表达载体；利用Bac-to-Bac昆虫表达系统表达MR1/IgG1 Fc二聚体融合蛋白，并通过双抗体夹心ELISA、Western blot及流式细胞术进行检测。建立MR1/IgG1 Fc二聚体加载的人工抗原提呈细胞(artificial antigen presenting cells, aAPCs),即MR1 aAPCs,提呈大肠埃希菌(DH5α)来源的代谢物，与人外周血单个核细胞共培养，检测MAIT细胞的活化和增殖水平。结果 经PCR及测序鉴定证实pFastBacTM Dual+β2m+MR1/IgG1 Fc]载体中MR...
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| 关 键 词： | 黏膜相关恒定T细胞 MR1/IgG1 Fc二聚体 人工抗原提呈细胞 反应性代谢物 |
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