| RNA干扰沉默hTERT基因对大肠癌SW480细胞生物学特性的影响 |
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| 引用本文： | 葛莲英,刘爱群,罗小玲,蔡艳玲. RNA干扰沉默hTERT基因对大肠癌SW480细胞生物学特性的影响[J]. 中华实验外科杂志, 2012, 29(2) |
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| 作者姓名： | 葛莲英 刘爱群 罗小玲 蔡艳玲 |
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| 作者单位： | 广西医科大学附属肿瘤医院内镜室, 南宁,530021 |
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| 基金项目： | 广西卫生厅重点科研资助项目，广西自然科学基金 |
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| 摘 要： | ![]()
目的 观察人端粒酶催化亚单位(hTERT)基因对SW480细胞生物学特性的影响.方法 将重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA (hTERT-shRNA)用脂质体转染法导人大肠癌细胞株SW480,实验分4组,每组设3个复孔,分别于转染后24、48、72 h,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测hTERT mRNA的表达,免疫细胞化学法检测hTERT蛋白表达,PCR-TRAP-ELISA法检测端粒酶活性,流式细胞仪检测细胞周期分布,终端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法和透射电镜观察细胞凋亡变化及共聚焦显微镜观察线粒体膜电位(MMP)的改变.结果 转染后48 h hTERT-shRNA组hTERT mRNA相对表达量为0.32±0.03,hTERT蛋白表达的平均灰度值为209.60±17.10,端粒酶A450 ～ A630值为2.242±0.284,较其他对照组均明显降低(P＜0.05,P＜0.01)；G0/G1期细胞为(49.37±1.63)％,增殖指数为(50.60±1.57)％,凋亡指数为22.2％,较其他对照组均明显增高(P ＜0.05,P＜0.01)；凋亡细胞体积明显缩小,表面突起和微绒毛减少,甚至消失,线粒体Rhodamine 123平均荧光强度为719.99±17.08,MMP水平显著下降(P＜0.01).结论 RNA干扰(RNAi)沉默hTERT基因能有效抑抑制SW480肿瘤细胞生长,并降低端粒酶活性,诱导肿瘤细胞凋亡.
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| 关 键 词： | RNA干扰 人端粒酶催化亚单位 基因沉默 大肠癌 |
An experimental study on colorectal carcinoma cell biological characteristics bv RNA interference technology of human telomerase reverse transcriptase gene silence |
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| GE Lian-ying , LIU Ai-qun , LUO Xiao-ling , CAI Yan-ling. An experimental study on colorectal carcinoma cell biological characteristics bv RNA interference technology of human telomerase reverse transcriptase gene silence[J]. Chinese Journal of Experimental Surgery, 2012, 29(2) |
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| Authors: | GE Lian-ying LIU Ai-qun LUO Xiao-ling CAI Yan-ling |
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| Abstract: | ![]()
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