| 卵巢癌相关抗原CA125串联重复序列的原核表达纯化及抗血清制备 |
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| 引用本文： | 梁勤东,郭变琴,汪仙桃,李武县,董晋豫,王秦,涂植光. 卵巢癌相关抗原CA125串联重复序列的原核表达纯化及抗血清制备[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2012, 28(11): 1154-1157 |
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| 作者姓名： | 梁勤东 郭变琴 汪仙桃 李武县 董晋豫 王秦 涂植光 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学检验医学院重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(81172016) |
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| 摘 要： | 目的:建立CA125串联重复序列(CA125R)原核表达系统,表达纯化重组CA125R蛋白并制备其抗血清.方法:全基因合成一段CA125串联重复序列,并将其克隆至pET-32a(+),构建CA125R蛋白原核表达载体pET-CA125R；将构建好的pET-CA125R载体转化至E coli BL21(DE3),确定最佳可溶性表达条件,通过Ni-NTA亲和层析系统纯化重组CA125R蛋白；纯化重组蛋白经Western blot方法验证后,免疫家兔制备抗血清.结果:成功构建CA125串联重复序列原核表达载体,确定了最佳可溶性诱导表达条件(0.5 mmol/LIPTG,15℃诱导6h)；Western blot结果证实纯化的重组蛋白正确,纯度高；制备的抗血清能特异识别重组CA125R蛋白和天然CA125糖蛋白.结论:成功建立了CA125R高效原核表达系统,并制备了高纯度重组CA125R蛋白及其抗血清.
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| 关 键 词： | CA125 原核表达 抗血清制备 |
Prokaryotic expression and purification of a tandem repeat of ovarian cancer antigen CA125 and preparation of its antiserum |
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| LIANG Qin-dong,GUO Bian-qin,WANG Xian-tao,LI Wu-xian,DONG Jin-yu,WANG Qin,TU Zhi-guang. Prokaryotic expression and purification of a tandem repeat of ovarian cancer antigen CA125 and preparation of its antiserum[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2012, 28(11): 1154-1157 |
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| Authors: | LIANG Qin-dong GUO Bian-qin WANG Xian-tao LI Wu-xian DONG Jin-yu WANG Qin TU Zhi-guang |
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| Affiliation: | College of Laboratory Medicine,Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics,Ministry of Education,Chongqing Medical University,Chongqing 400016,China |
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