| 二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞分化差异表达cDNA文库的构建 |
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| 引用本文： | 黄卫国,苏琦,黄琛,武明花,赵洁,周建国,周湘. 二烯丙基二硫诱导人白血病HL-60细胞分化差异表达cDNA文库的构建[J]. 中国药理学通报, 2004, 20(4): 445-448 |
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| 作者姓名： | 黄卫国 苏琦 黄琛 武明花 赵洁 周建国 周湘 |
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| 作者单位： | 南华大学肿瘤研究所,衡阳,421001 |
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| 基金项目： | 湖南省自然科学基金，湖南省卫生厅科研项目，湖南省教育厅科研项目 |
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| 摘 要： | 目的 应用抑制性消减杂交技术构建二烯丙基二硫(diallyldisulfide ,DADS)诱导人白血病细胞分化的消减杂交cDNA文库 ,以期克隆DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化的相关基因。方法 用DADS诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,提取polyA+ RNA ,反转录合成cDNA ,消化成短片段后分成两组 ,分别与两种不同的接头连接 ,再与未处理的白血病细胞cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR扩增 ,将PCR产物与pGEM T线性载体连接 ,转化大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑取克隆进行酶切鉴定。结果 成功地构建了具有高消减效率的DADS诱导白血病细胞分化的cDNA文库 ,随机挑取消 2 0 0个克隆制备质粒并酶切分析 ,其中 84 5 %的克隆均具有 1 0 0～ 6 0 0bp左右的插入片段 ,说明每一克隆中均含有特异性的目的片段 ,从而为大批量筛选、克隆DADS诱导人白血病细胞分化的相关未知新基因奠定了基础。结论 DADS能诱导人白血病HL 6 0细胞分化 ,并引起相关的基因发生改变 ,而抑制性消减杂交技术能有效地分离差异表达的基因。
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| 关 键 词： | 二烯丙基二硫 白血病 分化 抑制性消减杂交 |
| 文章编号： | 1001-1978(2004)04-0445-04 |
| 修稿时间： | 2003-09-10 |
Construction of differentially expressed cDNA library in human leukemia HL-60 cells induced by diallyl disfuld with suppression subtractive hybridization |
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| HUANG Wei Guo,SU Qi,HUANG Chen,WU Ming Hua,ZHAO Jie,ZHOU Jian Guo,ZHOU Xiang. Construction of differentially expressed cDNA library in human leukemia HL-60 cells induced by diallyl disfuld with suppression subtractive hybridization[J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2004, 20(4): 445-448 |
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| Authors: | HUANG Wei Guo SU Qi HUANG Chen WU Ming Hua ZHAO Jie ZHOU Jian Guo ZHOU Xiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | diallyl disfuld leukemia differentiation suppression subtractive hybridization |
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