应用Fura-2/AM测定兔视网膜细胞内游离钙的方法 |
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引用本文: | 刘丰,宣波,张民英,肖继皋.应用Fura-2/AM测定兔视网膜细胞内游离钙的方法[J].中华眼底病杂志,1996(2). |
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作者姓名: | 刘丰 宣波 张民英 肖继皋 |
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作者单位: | 南京医科大学分子生物学研究所 药理教研室 |
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摘 要: | 目的:建立适宜条件下,用荧光指示剂Fura-2测定乳兔视网膜细胞内游离钙(简称[Ca2+]i)的方法。方法:用酶解制备视网膜细胞悬液。Fura-2/AM负载进行荧光测定。结果:经0.05%胰蛋白酶消化10分钟,可使细胞存活率达90%以上。在37℃条件下与Fura-2/AM温育40分钟,于30分钟内测定为最佳条件。结论:静息状态下[Ca2+]i水平为(223±27)nmol/L,其值在文献报道范围内。高钾去极化,在K+为25mmol/L和50mmol/L时,分别使[Ca2+]i增加了59%和148%,由此证明视网膜细胞悬液制备和测定方法是可行的
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关 键 词: | 视网膜,钙,分析 |
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