生、制枳实换用的枳实芍药散对便秘型肠易激综合征大鼠“脑-肠-菌”轴功能的影响

目的 从“脑-肠-菌”轴的角度探讨生、制枳实换用的枳实芍药散改善便秘型肠易激综合征（C-IBS）大鼠的作用机制。方法 将80只大鼠随机分为空白组、模型组、匹维溴铵组（15.625 mg·kg^-1）、生枳实芍药散组、清炒枳实芍药散组、麸炒枳实芍药散组、炒炭枳实芍药散组、成品枳实芍药散组（3.75 g·kg^-1），每组10只。除空白组灌胃常温0.9%氯化钠溶液外，其余各组均灌胃0~4 ℃冰0.9%氯化钠溶液（2 mL·d^-1，共14 d）建立C-IBS大鼠模型。连续给药14 d后检测大鼠粪便含水量、小肠推进率；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测5-羟色胺（5-HT）、血管活性肠肽（VIP）、神经肽Y（NPY）、降钙素基因相关肽（CGRP）、P物质（SP）、二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-LA）水平；苏木素-伊红（HE）染色观察结肠组织病理损伤变化；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测结肠组织环磷酸腺苷（cAMP）、蛋白激酶A（PKA）、水通道蛋白3（AQP3） mRNA的表达及蛋白免疫印迹法（Western blot）检测结肠组织VIP和AQP3蛋白的表达；采用气质联用色谱法（GC-MS）检测短链脂肪酸（SCFAs）含量的变化。结果 与空白组比较，模型组大鼠粪便含水量、小肠推进率显著降低（P<0.01）；血清中5-HT、VIP、CGRP、SP水平显著上升，NPY水平显著下降（P<0.01）；血浆中DAO和D-LA水平显著升高（P<0.01）；结肠组织黏膜上皮轻度破损，杯状细胞减少且腔内颗粒明显减少；结肠组织中AQP3、cAMP、PKA mRNA表达水平和AQP3、VIP蛋白表达水平明显下降（P<0.05，P<0.01）；粪便中SCFAs总量呈明显下降趋势，其中，乙酸、异丁酸、异戊酸、戊酸、己酸含量显著减少，丙酸、丁酸含量明显上升（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，各给药组均明显提高C-IBS大鼠小肠推进率，改善肠黏膜屏障功能，调整模型大鼠血清中脑肠肽水平（P<0.05，P<0.01），明显升高大鼠结肠组织中AQP3、cAMP、PKA mRNA及VIP、AQP3蛋白的表达水平（P<0.05，P<0.01），除异丁酸外各给药组对大鼠粪便中短链脂肪酸含量均具有显著回调作用，并且麸炒枳实入药的枳实芍药散的作用稍强于其他炮制品枳实入药的枳实芍药散。结论 生、制枳实换用的枳实芍药散可通过对“脑-肠-菌”轴功能的调节来改善C-IBS，并且使用麸炒枳实入药的枳实芍药散效果更佳。

Effect of Raw and Processed Aurantii Fructus Immaturus Switched to Zhishi Shaoyaosan on Function of Brain-Gut-Microbiota Axis in Rats with Constipation-predominant Irritable Bowel Syndrome