肝癌Hep3B细胞蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子表达水平对凋亡素诱导凋亡的作用

目的：探讨肝癌HepB3细胞中蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子（CIP2A）的表达水平对凋亡诱导凋亡效率的影响，为研究凋亡素特异性诱导肿瘤细胞凋亡的机制提供依据。方法：定制合成CIP2A特异性siRNA，构建真核表达质粒pcDNA3-HA-Apoptin。以pcDNA3-HA-Apoptin和CIP2A siRNA共转染HepB3细胞作为实验组，转染pcDNA3-HA-Apoptin和CIP2A scrambled siRNA的HepB3细胞作为阳性对照组，转染pcDNA3和CIP2A siRNA的HepB3细胞作为阴性对照组，转染pcDNA3和CIP2A scrambled siRNA的HepB3细胞作为空白对照组。Western blotting法检测各组HepB3细胞中CIP2A和HA-Apoptin表达水平；流式细胞术检测各组HepB3细胞凋亡率；免疫荧光法检测各组HA-Apoptin在HepB3细胞核、质分布。结果：Western blotting法检测，与阴性对照组比较，实验组HepB3细胞内中CIP2A表达水平显著下降（P<0.001）；Western blotting和流式细胞术检测，与阳性对照组比较,实验组HepB3细胞凋亡率显著降低（P<0.01）；免疫荧光法检测，与阳性对照组比较，实验组HA-Apoptin在HepB3细胞质内的分布增多。结论：肝癌HepB3细胞中CIP2A表达水平下调降低了凋亡素诱导的凋亡。