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腺病毒介导酸性成纤维生长因子对兔角膜内皮细胞感染及促增殖作用的实验研究
引用本文:Liu L,Wang Y,Pan X,Zhong M,Wen XF,Qi ZT,Liu ZY,Liu H,Tang WQ. 腺病毒介导酸性成纤维生长因子对兔角膜内皮细胞感染及促增殖作用的实验研究[J]. 中华眼科杂志, 2004, 40(3): 156-159
作者姓名:Liu L  Wang Y  Pan X  Zhong M  Wen XF  Qi ZT  Liu ZY  Liu H  Tang WQ
作者单位:1. 200433,上海,第二军医大学第一附属医院眼科
2. 第二军医大学微生物教研室
基金项目:上海市百名跨世纪优秀学科带头人培养计划 (百人计划 )基金资助项目 (0 5 7)
摘    要:目的 观察复制缺陷型重组腺病毒载体介导酸性成纤维生长因子 (aFGF)对体外培养的兔角膜内皮细胞 (RCEC)的感染效率和促增殖作用。方法  2 93A细胞扩增复制缺陷型重组腺病毒 ,选用细胞半数感染剂量 (TCID50 )法测定病毒滴度。体外培养RCEC ,用携带报告基因 (LacZ)的重组腺病毒 (Ad LacZ)感染RCEC ,二甲基甲酰胺 (X gal)染色估计瞬时感染效率 ,将含aFGF的重组腺病毒 (Ad aFGF)感染RCEC ,RT PCR、Westernblot分别检测aFGF转录及蛋白质表达情况 ,噻唑盐 (MTT)法检测转基因细胞增殖情况。结果 病毒滴度为 2× 10 8pfu/ml;重组腺病毒感染RCEC 2 4h后即可检测到外源基因表达 ,当感染倍数 (MOI)值等于 2 0时 ,Ad LacZ对RCEC的感染效率为 10 0 % ,感染Ad aFGF对RCEC增殖有促进作用 (F =2 17.10 7,P <0 .0 5 )。结论 复制缺陷型重组腺病毒载体介导的外源基因在RCEC中可有效表达 ,感染Ad aFGF对RCEC增殖具有促进作用。

关 键 词:腺病毒 酸性成纤维生长因子 兔 角膜内皮细胞感染 促增殖作用 实验 基因治疗

Infection of recombinant adenovirus expressing acidic fibroblasts growth factor enhances rabbit corneal endothelium proliferation
Liu Lin,Wang Yong,Pan Xin,Zhong Ming,Wen Xin-Fu,Qi Zhong-Tian,Liu Zhi-Yong,Liu Hong,Tang Wei-Qiang. Infection of recombinant adenovirus expressing acidic fibroblasts growth factor enhances rabbit corneal endothelium proliferation[J]. Chinese Journal of Ophthalmology, 2004, 40(3): 156-159
Authors:Liu Lin  Wang Yong  Pan Xin  Zhong Ming  Wen Xin-Fu  Qi Zhong-Tian  Liu Zhi-Yong  Liu Hong  Tang Wei-Qiang
Affiliation:Department of Ophthalmology, First Affiliated Hospital, the Second Military Medical University, Shanghai 200433, China. linliu@public6.sta.net.cn
Abstract:
Keywords:Adenoviridae  Fibroblast growth factor 1  Gene therapy  Endothelium   corneal  Cell culture
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