基于钙敏感受体探讨花旗泽仁改善胰岛素抵抗的作用机制

目的 通过观察花旗泽仁对胰岛素抵抗(IR)细胞中钙敏感受体(CaSR)基因、蛋白表达及AKT活性的影响,探究花旗泽仁改善IR的分子机制。方法 采用肿瘤坏死因子(TNF-α)体外诱导培养法建立L6肌细胞IR模型；采用免疫荧光技术检测CaSR在L6肌细胞中的分布；采用qRT-PCR检测L6肌细胞内CaSR基因表达水平；采用Western blot法检测L6肌细胞内CaSR蛋白、及磷酸化AKT(Ser473和Thr308)蛋白表达水平,并观察CaSR激动剂对L6肌细胞IR模型AKT活性的影响。结果与正常对照组比较,模型对照组细胞的葡萄糖消耗量明显降低(P<0.05)、CaSR在模型组中的分布较稀疏、mRNA表达水平显著降低(P=0.000)、蛋白表达量显著降低(P=0.000)、细胞中磷酸化AKT(Ser473和Thr308)蛋白表达量明显下降(P=0.000)；与模型对照组比较,花旗泽仁组CaSR的分布较密集、mRNA表达水平明显升高(P<0.01)、蛋白表达量明显增加(P=0.000)、细胞中磷酸化AKT(Ser473和Thr308)表达量明显上升(P<0.01)。结论 L6肌细胞发生IR时,CaSR mRNA及蛋白表达量降低,AKT活性被抑制,CaSR激动剂可增强AKT活性,提示CaSR可以调控AKT；花旗泽仁可能通过上调CaSR表达水平,激活与IR关系密切的PI₃K/AKT信号通路中的AKT活性,从而改善IR。