高糖环境下法舒地尔调控自噬对原代心肌细胞凋亡的作用

目的 探讨高糖环境下,法舒地尔对原代心肌细胞凋亡的作用及自噬在其中的作用。方法 分离培养原代心肌细胞,使用不同葡萄糖浓度培养基培养细胞,并使用法舒地尔及3-MA干预。检测细胞凋亡,测定Bcl-2、Bax、MYPT-1、p-MYPT1、LC3、P62等蛋白的表达,并检测ROCK1和ROCK2的mRNA表达量。结果 高糖环境下,原代心肌细胞凋亡比例升高,Bcl-2表达下降、Bax表达增多,ROCK1、ROCK2 mRNA表达增加,p-MYPT1/MYPT1比值降低;法舒地尔可抑制高糖环境下原代心肌细胞凋亡比例,Bcl-2升高、Bax水平降低,ROCK1、ROCK2 mRNA表达减少、p-MYPT1/MYPT1比值降低。高糖环境下不可溶性P62表达增多;法舒地尔干预后,不可溶性P62蛋白表达减少、可溶性P62蛋白表达增多、同时LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增大。在法舒地尔干预基础上应用自噬流抑制剂3-甲基腺嘌呤,可见到细胞凋亡比例升高、Bcl-2下降及Bax水平的升高、不可溶性P62表达增多(P<0.05)。结论 高糖环境下,法舒地尔通过活化自噬流抑制原代心肌细胞凋亡。