人体肝脏核糖核酸酶的纯化、特征及放射免疫测定 |
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引用本文: | 尤少方.人体肝脏核糖核酸酶的纯化、特征及放射免疫测定[J].国际检验医学杂志,1983(4). |
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作者姓名: | 尤少方 |
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摘 要: | 多种疾病能导致血清核糖核酸酶(RNase)活性升高。目前血清核糖核酸酶浓度的测定采用酶学方法。但该法不能区分核糖核酸酶的来源。本文用肝素亲和层析等一系列技术来纯化人肝核糖核酸酶,并用此制剂首次建立了一种敏感、特异而且重复性好的人肝RNase放射免疫测定法。人肝RNase的纯化及其特征通过缓冲液抽提、酸分离、磷酸纤维素柱层析、Sephadex G-150和Sephadex G-100凝胶层析、聚鸟嘌岭核苷酸亲和层析和肝素亲和层析等步骤,从人肝脏组织中提取并纯化了核糖核酸酶。纯化后的人肝核糖核酸酶在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈单一的狭窄区带;在pH4.3聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈单一的,但略为扩散的区带。酶活性和蛋白区带相吻合。该酶由SDS聚丙烯酰胺电泳测
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