乙型肝炎病毒e抗原对Bewo细胞RIG-I和MAVS表达的作用

目的探讨乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)对Bewo细胞维甲酸诱导基因-I(retinoic acid-inducible-I,RIG-I)和线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS)表达的作用。方法首先以终浓度2 μg/mL的RIG-I配体poly(dAT∶dAT)处理Bewo细胞24 h,观察RIG-I、MAVS mRNA的表达。然后将5 μg HBeAg重组质粒pcDNA3.1(+)-HBe转染Bewo细胞,转染48 h后,以2 μg/mL的poly(dAT∶dAT)刺激24 h。采用实时荧光定量反转录PCR和酶联免疫吸附测定分别检测细胞RIG-I、MAVS mRNA表达及上清干扰素-β(interferon-β,IFN-β)水平。并采用免疫荧光染色法观察HBeAg对细胞核因子-κB（nuclear factor-κB,NF-κB）p65入核的影响。结果poly(dAT∶dAT)可诱导Bewo细胞RIG-I、MAVS mRNA表达(27.86±9.49,21.75±8.04),高于对照组(14.51±6.27,11.59±4.73)(P<0.01)。转染5 μg HBeAg重组质粒组poly(dAT∶dAT)可诱导Bewo细胞RIG-I、MAVS mRNA表达(13.33±4.23,10.48±3.17)及IFN-β产生 (14.20±5.01)pg/mL],低于对照组27.86±9.49,21.75±8.04;(47.69±14.3)pg/mL](P<0.01),但与pcDNA3.1-HBe-5组11.82±3.58,9.39±3.22;(10.82±3.75)pg/mL]比较,差异无统计学意义(P>0.05)。且HBeAg可干扰poly(dAT∶dAT)诱导Bewo细胞NF-κB p65入核,抑制NF-κB的激活。结论HBeAg可下调Bewo细胞RIG-I、MAVS mRNA的表达,并抑制NF-κB入核及IFN-β产生,这可能是乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)逃避宿主免疫应答的一种重要策略。

The effect of HBeAg on expression of retinoic acid-inducible-I and mitochondrial antiviral signaling protein in Bewo cells