| 实时荧光定量PCR检测人类EZH2基因方法的建立 |
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| 引用本文： | 陈凤花,胡丽华,王琳,李一荣,周志明.实时荧光定量PCR检测人类EZH2基因方法的建立[J].临床血液学杂志,2007,4(6). |
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| 作者姓名： | 陈凤花 胡丽华 王琳 李一荣 周志明 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科,武汉,430022 |
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| 摘 要： | 目的:建立SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测人类EZH2基因的方法.方法:将EZH2 RT-PCR扩增片段克隆入载体pGEM-T后,经测序鉴定正确后,进行纯化和定量及系列稀释,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测EZH2,建立标准曲线,熔解曲线分析产物的特异性.结果:该法检测的最低拷贝数为10,线性范围为101～108拷贝,相关系数r为-1.00,104copies/μl标本的批内变异系数(CV)和日间CV分别为1.0%和2.7%.熔解曲线分析显示单一的峰,熔解温度(Tm)为(83.42±0.13)℃.结论:实时荧光定量PCR方法检测EZH2基因,具有高敏感性、高特异性和高精确性等优点,可作为进一步研究EZH2的方法.
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| 关 键 词： | EZH2基因 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量PCR |
Quantification of human EZH2 by using SYBR green Ⅰ real-time fluorescent polymerase chain reaction |
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| CHEN Fenghua,HU Lihua,WANG Lin,LI Yirong,ZHOU Zhiming.Quantification of human EZH2 by using SYBR green Ⅰ real-time fluorescent polymerase chain reaction[J].Journal of Clinical Hematology,2007,4(6). |
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| Authors: | CHEN Fenghua HU Lihua WANG Lin LI Yirong ZHOU Zhiming |
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