| 短发夹RNA表达载体对2型单纯疱疹病毒UL54基因的干扰效应 |
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| 引用本文： | 吕延成,潘晓瑜,樊俊,黄畅. 短发夹RNA表达载体对2型单纯疱疹病毒UL54基因的干扰效应[J]. 中国厂矿医学, 2014, 0(8): 901-903 |
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| 作者姓名： | 吕延成 潘晓瑜 樊俊 黄畅 |
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| 作者单位： | 遵义医学院珠海校区生物化学与分子生物学教研室,广东省珠海市519041 |
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| 基金项目： | 贵州省科学技术基金项目（黔科合J字[2008]2313号） |
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| 摘 要： | 目的研究短发夹核糖核酸（shRNA）表达载体对2型单纯疱疹病毒（HSV-2）UL54基因的干扰效应。方法针对HSV-2 UL54基因,构建5个靶向HSV-2 UL54基因的短发夹RNA重组表达载体（shRNA1081、shRNA1092、shRNA1276、shRNA1407、shRNA1508）,同时设计不针对任何基因的序列为阴性对照组（阴性对照组）及不加任何重组表达载体的空白对照（空白对照组）。重组表达载体通过脂质体转染人胚胎肾细胞（HEK293）后接种HSV-2,48 h后利用荧光定量RT-PCR检测各组细胞UL54 mRNA的表达水平,终点滴定法测定HSV-2子代病毒滴度。结果荧光定量RT-PCR结果示,与空白对照组相比,shRNA1081、shRNA1407和shRNA1508能够降低HSV-2 UL54 mRNA的表达水平（P均〈0.01）;对UL54基因的抑制率在阴性对照组（加shRNA NC）、shRNA1081组、shRNA1407组、shRNA1508组分别为7%、69%、56%及55%,以shRNA1081组为最高。终点滴定法结果示,与空白对照组比较,shRNA 1081组、shRNA 1407组、shRNA 1508组病毒滴度不同程度下降（P均〈0.01）。结论成功构建UL54 shRNA重组表达载体,shRNA1081、shRNA1407、shRNA1508能在体外细胞水平上不同程度地干扰HSV-2 UL54基因表达,从而抑制HSV-2在HEK293细胞中的复制。
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| 关 键 词： | 短发夹核糖核酸 核糖核酸干扰 2型单纯疱疹病毒 UL54基因 |
Interference effect of shRNA expression vectors on herpes simplex virus type 2 UL54 gene in vitro |
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| LU Yan-cheng,PAN Xiao-yu,FAN Jun,HUANG Chang. Interference effect of shRNA expression vectors on herpes simplex virus type 2 UL54 gene in vitro[J]. Chinese Medicine of Factory and Mine, 2014, 0(8): 901-903 |
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| Authors: | LU Yan-cheng PAN Xiao-yu FAN Jun HUANG Chang |
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| Affiliation: | . (Department of Biochemistry and Molecular Biology, Zhuhai Campus, Zunyi Medical College, Zhuhai, Guangdong Province 519041, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Short hairpin ribonucleic acid （ shRNA ） Ribonucleic acid interference （ RNAi ） Herpessimplex virus type 2 UL54 gene |
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