软骨细胞形态对其缝隙连接的影响

目的：探讨体外培养状态下新生兔软骨细胞的缝隙连接（gap junction)与软骨细胞形态、表型的关系。方法：1．向形成集落的兔膝关节软骨细胞（第5代）培养基内加入荧光染料CFDA－AM,经激光共聚焦显微镜测量不同形态的单个软骨细胞内的荧光强度。2．以激光淬灭软骨细胞内的荧光后定时测量其荧光的恢复曲线。3．将因股骨颈骨折而行人工关节置换的人股骨头关节软骨切成20um薄片,同样加入荧光染料后测定淬灭前后荧光强度。结果：1．各种形态的扁平状软骨细胞摄入CFDA－AM后平均荧光强度差异很大（范围1－274,n=30),平均值明显低于单个球形软骨细胞（平均2057,范围340－3538,n＝30）。2．只有集落中央的球形软骨细胞才有逐渐的荧光恢复。3．人股骨头关节软骨陷窝内软骨细胞内的荧光经激光淬灭后可以恢复。结论：1．软骨细胞的形态影响其荧光染料的摄入量。2．缝隙连接只出现在球形软骨细胞之间,它与软骨细胞的特有表型同时出现。