HIF-1α基因miR RNAi慢病毒载体的构建与鉴定 |
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作者姓名: | 曾东风 孔佩艳 陈幸华 张曦 梁雪 高蕾 彭贤贵 王庆余 |
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作者单位: | 第三军医大学新桥医院血液内科,重庆市医学重点学科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院血液内科,重庆市医学重点学科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院血液内科,重庆市医学重点学科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院血液内科,重庆市医学重点学科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院血液内科,重庆市医学重点学科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院血液内科,重庆市医学重点学科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院血液内科,重庆市医学重点学科,重庆,400037;第三军医大学新桥医院血液内科,重庆市医学重点学科,重庆,400037 |
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基金项目: | 军队科研攻关计划面上项目 , 国家自然科学基金 , 重庆市医学重点学科建设基金 , 第三军医大学新桥医院1520人才培养工程基金 |
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摘 要: | 目的 构建人HIF-1α的miR RNAi慢病毒载体.方法 利用已经构建成功的针对人HIF-1α基因的miRNA干扰质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFP-HIF-1α miR,通过BP/LR反应,将EmGFP-HIF-1α-miR表达框整合重组到产毒质粒pLenti6/V5-DEST中测序鉴定,用PLP1、PLP2和PLP/VSVG质粒共转染包装293FT细胞产毒,并利用GFP蛋白表达水平进行滴度测定.结果 经测序鉴定证实成功构建针对人HIF-1α基因的miRNA慢病毒干扰载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-HIF-1α miR.结论 成功构建针对人HIF-1α基因的miRNA慢病毒RNA干扰载体.
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关 键 词: | 缺氧诱导因子-1α(HIF-1α) RNA干扰(RNAi) 慢病毒 绿色荧光蛋白(GFP) |
文章编号: | 1671-8348(2007)17-1707-02 |
修稿时间: | 2007-04-13 |
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