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| 人皮肤角质形成细胞和成纤维细胞的原代培养和鉴定的实验研究 | |
| 引用本文： | 孙文娟,蔡霞,唐胜建,刘亚红,周晓燕,马桂莲,张鹏. 人皮肤角质形成细胞和成纤维细胞的原代培养和鉴定的实验研究[J]. 潍坊医学院学报, 2004, 26(6): 401-403,F003 |
| 作者姓名： | 孙文娟 蔡霞 唐胜建 刘亚红 周晓燕 马桂莲 张鹏 |
| 作者单位： | 1. 潍坊医学院整形外科研究所,山东,潍坊,261042 2. 潍坊市人民医院 3. 青岛市胶州中心医院 |
| 摘 要： | 目的建立人皮肤角质形成细胞(keratinocyte)成纤维细胞(fibmblast)原代培养和体外连续培养的模型，为组织工程化皮肤提供充足的种子细胞。方法以5-15岁小儿包皮为材料，胰蛋白酶消化后，分离两种细胞，分别用无血清表皮培养液(K-SFM)、DMEM(10％血清)培养，对年轻细胞(2-4代角质形成细胞，10-40代成纤维细胞)均用倒置显微镜进行大体观察，透射电镜进行超微结构观察，并拍照记录，同时进行免疫细胞化学鉴定。结果消化后得到大量细胞，在培养2周后开始传代，光镜下角质形成细胞呈典型铺路石状，透射电镜下呈多边形，符合角质形成细胞特征；成纤维细胞光镜下呈梭形，放射状或漩涡状排列，电镜证实是成纤维细胞。免疫细胞化学检测：角质形成细胞鼠抗人角蛋白(AE1／AE3)单克隆抗体(mouse anti-cytokeratin)染色阳性；成纤维细胞鼠抗人Ⅰ型，Ⅲ型胶原单克隆抗体(mouse anti-TypeⅠ，ⅢCollagen)和鼠抗人波形蛋白单克隆抗体(mouse anti-vim-entin)染色阳性。结论用简便易行，经济实用的方法在体外对角质形成细胞和成纤维细胞进行分离、培养和传代，能同时得到足够数量的组织工程皮肤的种子细胞。 |
| 关 键 词： | 角质形成细胞 成纤维细胞 细胞原代培养 组织工程皮肤 |
| 文章编号： | 1004-3101(2004)06-0401-03 |
Experimental Studies on Primary Cultivation and Identification of Human Keratinocytes and Fibroblasts |
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| SUN Wen-juan,CAI Xia,TANG Sheng-jian,LIU Ya-hong,ZHOU Xiao-yan,MA Gui-lian,ZHANG Peng. Experimental Studies on Primary Cultivation and Identification of Human Keratinocytes and Fibroblasts[J]. Journal of Weifang Medical College, 2004, 26(6): 401-403,F003 | |
| Authors: | SUN Wen-juan CAI Xia TANG Sheng-jian LIU Ya-hong ZHOU Xiao-yan MA Gui-lian ZHANG Peng |
| Affiliation: | SUN Wen-juan1,CAI Xia1,TANG Sheng-jian1,LIU Ya-hong2,ZHOU Xiao-yan1,MA Gui-lian3,ZHANG Peng1 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Keratinocytes Fibroblasts Cell culture Tissue engineering skin |
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