鳖甲煎丸调控lncRNA SNHG5/miRNA-26a-5p/GSK-3β信号轴干预原发性肝癌的作用机制

目的 基于长链非编码RNA SNHG5 （lncRNA SNHG5） /微小RNA-26a-5p （miRNA-26a-5p） /糖原合成酶激酶-3β （GSK-3β） 信号轴探究鳖甲煎丸干预原发性肝癌的作用机制。方法 双荧光素酶报告实验验证HepG2细胞内lncRNA SNHG5与miRNA-26a-5p，miRNA-26a-5p与GSK-3β的靶向互作关系。建立人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型，随机分为模型组，鳖甲煎丸低、中、高剂量组（0.5、1.0、2.0 g·kg^-1），索拉非尼组（100 mg·kg^-1），每组10只。分别予以生理盐水或药物灌胃28 d，并于不同时间测量裸鼠瘤体积。苏木素-伊红（HE）染色观察肿瘤组织形态学改变；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤组织中lncRNA SNHG5、miRNA-26a-5p、GSK-3β及β-连环蛋白（β-catenin） mRNA的核酸水平差异；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肿瘤组织中GSK-3β、β-catenin的蛋白表达水平。结果 与SNHG5-野生型（WT）+miRNA内参（NC）组比较，SNHG5-WT+miRNA-26a-5p mimic（模拟物）组的相对荧光素酶活性明显降低（P<0.05）。与GSK-3β-WT+miRNA NC组比较，GSK-3β-WT+miRNA-26a-5p mimic组的相对荧光素酶活性明显降低（P<0.05）。与模型组比较，鳖甲煎丸低、中、高剂量组裸鼠肿瘤体积明显减小（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，鳖甲煎丸各剂量组裸鼠瘤体组织内细胞排列明显稀疏，部分细胞坏死，且呈浓度依赖性变化。与模型组比较，鳖甲煎丸各剂量组lncRNA SNHG5、GSK-3β及β-catenin的表达均明显下降（P<0.05，P<0.01），miRNA-26a-5p的表达均明显升高（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，鳖甲煎丸各剂量组的关键蛋白GSK-3β及β-catenin表达均明显降低（P<0.05，P<0.01）。结论 鳖甲煎丸可能通过lncRNA SNHG5/miRNA-26a-5p/GSK-3β信号轴，影响肝癌细胞坏死从而发挥抗肿瘤作用，该研究为鳖甲煎丸临床应用提供更多的理论依据。