摘 要: | 目的探讨重组可溶性白细胞介素-4受体(IL-4R)对大鼠哮喘模型的影响。方法根据Gen Bank公布的Homo sapiens(human)IL-4R基因序列(XM005255309),合成srh IL-4R基因片段,将合成基因片段插入p ET-28a(+)构建重组表达载体p ET-28a(+)-srh IL-4R,酶切鉴定后,将载体转入表达菌株BL21(DE3)进行诱导表达重组蛋白srh IL-4R,并用SDS-PAGE和Western-blotting方法分析重组蛋白。提取重组蛋白干预哮喘模型大鼠,取肺组织进行病理切片观察。结果重组载体p ET-28a(+)-srh IL-4R酶切获得长度为500bp750bp的目的片段,表达载体p ET-28a(+)-srh IL-4R转入表达菌BL21(DE3)后经IPTG诱导表达出的重组蛋白经SDS-PAGE和Westernblotting方法可见重组蛋白分子量约为25k Da;重组人可溶性IL-4R蛋白干预哮喘大鼠可见肺组织炎细胞数量较模型组明显减少。结论 srh IL-4R防治哮喘具有一定作用。
|