血清γ-谷氨酰基转肽酶ELISA检测方法的建立及其在原发性肝癌诊断中的临床应用研究 |
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作者姓名: | 刘峰 左媛 许文雅 |
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作者单位: | 1.内蒙古医学院第二附属医院检验科,内蒙古呼和浩特,010030;2.内蒙古医学院第二附属医院检验科,内蒙古呼和浩特,010030;3.内蒙古医学院第二附属医院检验科,内蒙古呼和浩特,010030 |
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摘 要: | 目的 建立可用于血清蔓陀罗凝集素(DSA)-γ-谷氨酰基转肽酶(GGT)检测的酶联免疫吸附法(ELISA),并探讨其在原发性肝癌(PHC)诊断中应用价值.方法 制备抗DSA-GGT 单克隆抗体(McAb),经蛋白G亲和层析柱色谱纯化后进行生物素标记,构建血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法.用建立的方法对健康者、PHC患者和非PHC患者进行DSA-GGT检测,并进行方法学评价;采用受试者工作曲线(ROC曲线)确定DSA -GGT诊断PHC的临界值.结果 所构建ELISA检测方法的最低检测限为2 μg/L,平均批内、批间变异分别为8.9%和11.5%.健康者血清DSA-GGT水平呈正态分布,参考范围为(1.50±0.51)μg/L;经ROC曲线分析,确定其诊断PHC的临界值为3.25 μg/L;其诊断PHC灵敏度为66.7%(28/40)、特异度为91.8%(112/122).结论 所建立的血清DSA-GGT生物素-链霉亲和素ELISA检测方法具有良好方法学性能,其诊断PHC的灵敏度、特异度良好,为PHC实验室诊断提供了新的方法.
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关 键 词: | 肝肿瘤 γ-谷氨酰转移酶 抗体,单克隆 酶联免疫吸附测定 抗生物素蛋白 |
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