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马来丝虫非放射性寡核苷酸探针的制备及现场应用研究
引用本文:黄志彪,黄少玉,阮彩文,潘波,吴旭光,沈秀婷,邓卓晖,崔惠儿,游恒龙,姚良治. 马来丝虫非放射性寡核苷酸探针的制备及现场应用研究[J]. 中国病原生物学杂志, 2002, 15(4): 211-213
作者姓名:黄志彪  黄少玉  阮彩文  潘波  吴旭光  沈秀婷  邓卓晖  崔惠儿  游恒龙  姚良治
作者单位:1. 广东省疾病预防控制中心,广东广州,510300
2. 广东省平远县卫生防疫站,广东梅州,514600
基金项目:广东省医学科学技术研究基金资助 (No.A1 9970 58)~~
摘    要:
目的 寻找一种高度特异、敏感的马来丝虫的检测方法 ,并将其用于现场检测。 方法 根据马来丝虫 Hha 重复序列 ,合成马来丝虫特异性引物 1对和寡核苷酸探针 1条 ,采用地高辛加尾标记试剂盒对人工合成寡核苷酸探针进行非放射性标记 ,并对标记后的探针进行标记效率检测 ;将血液标本和蚊虫标本分别用蛋白酶 K等处理液和 Chelex- 10 0处理后 ,结合 PCR技术 ,对该探针的特异性和敏感性进行检测 ;并将此探针用于平远县马来丝虫病的监测。 结果 经测定 ,标记后探针的有效浓度为 1.5~ 2 fmol/μl;结合 PCR技术 ,该探针可检出 10 0 μl阳性血样中 1条微丝蚴 ;5 0只蚊中含有 1只只感染 1条幼丝虫阳性蚊亦能准确检出。班氏丝虫等其它寄生虫标本的检测结果均为阴性 ;采自平远县的 2 4 0份血液标本和 10 0 8只中华按蚊标本均为阴性。 结论 该探针杂交检测方法特异性强 ,敏感性高 ,可作为一种新的马来丝虫病监测方法在现场中使用。

关 键 词:丝虫  马来  微丝蚴  幼丝虫  非放射性寡核苷酸探针  检测
文章编号:1001-6627(2002)04-0211-03
修稿时间:2001-06-04

PREPARATION OF A DIG-OLIGONUCLEOTIDE PROBE OF BRUGIA MALAYI AND APPLICATION IN THE FIELD
HUANG Zhi biao ,HUANG Shao yu ,RUAN Cai wen ,Pan Bo ,WU Xu guang ,SHEN Xiu ting ,DENG Zhuo hui ,CUI Hui er ,YOU Hen long ,YAO Liang zhi. PREPARATION OF A DIG-OLIGONUCLEOTIDE PROBE OF BRUGIA MALAYI AND APPLICATION IN THE FIELD[J]. Journal of Pathogen Biology, 2002, 15(4): 211-213
Authors:HUANG Zhi biao   HUANG Shao yu   RUAN Cai wen   Pan Bo   WU Xu guang   SHEN Xiu ting   DENG Zhuo hui   CUI Hui er   YOU Hen long   YAO Liang zhi
Affiliation:HUANG Zhi biao 1,HUANG Shao yu 1,RUAN Cai wen 1,Pan Bo 1,WU Xu guang 1,SHEN Xiu ting 1,DENG Zhuo hui 1,CUI Hui er 1,YOU Hen long 2,YAO Liang zhi 2
Abstract:
Keywords:Brugia malayi  microfilariae  filarial larvae  nonradiative oligonucleotide probe  detection of filariasis
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