Notch信号通路促进小鼠胸骨软骨细胞终末期成熟分化的实验研究

目的研究Notch信号通路对小鼠胸骨软骨细胞终末期成熟分化的促进作用及其成软骨分化的抑制作用。方法用鼠龄4 d昆明新生小鼠,分离和培养新生小鼠胸骨软骨细胞;NICD1慢病毒转染,提高细胞内Notch信号通路活性。实时聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测细胞内终末期成熟分化因子和成软骨因子基因的表达;用碱性磷酸酶(ALP)染色和Alcian蓝染色方法检测软骨细胞内ALP和蛋白多糖的分泌。将细胞分为2组:对照组和NICD1组,比较两组细胞内各因子基因和蛋白的表达不同。结果新生小鼠的胸骨软骨细胞具有自发性终末期成熟分化的特点;经NICD1慢病毒转染后,软骨细胞内NICD1的蛋白表达显著提高。与对照组相比,NICD1组细胞内终末期成熟分化因子的基因表达和ALP分泌明显增加(P0.05);而成软骨分化因子的基因表达和蛋白多糖分泌明显降低(P0.05)。结论 Notch信号通路可促进小鼠胸骨软骨细胞终末期成熟分化,并抑制其向成软骨分化。