导入TAP基因上调其在肺腺癌细胞系的表达

目的克隆TAP1及TAP2基因，分别转染TAP1及TAP2表达下调的人肺腺癌细胞系Anip973，以提高其表达水平，从而增强肿瘤细胞的抗原提呈能力。方法采用RT-PCR方法自EBV刺激的B-LCLs克隆TAP1及TAP2基因，与pcDNA3．1／V5-His-TOPO TA Expression vector连接，构建真核细胞表达载体，脂质体法(Lipofectamine^TM2000)转染人肺腺癌细胞系Anip973，经G418筛选4-6周，通过RT-RCR检测TAP1及TAP2的表达。结果经测序确认已成功克隆人TAP1及TAP2基因，建立稳定表达TAP1或TAP2的细胞系，经RT-PCR分析，Anip973细胞TAP1、TAP2的mRNA表达明显增加。结论基因转染可恢复肿瘤细胞TAP1及TAP2的表达，为增强MHCⅠ类分子提呈肿瘤抗原奠定了基础。