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人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定
引用本文:徐波,郑永晨,费邵阳.人CDC2基因的克隆和原核表达及鉴定[J].吉林大学学报(医学版),2007,33(5):834-836.
作者姓名:徐波  郑永晨  费邵阳
作者单位:1.吉林大学第二医院中心实验室,吉林 长春 130041;2.吉林省第三人民医院神经外科,吉林 四平 136000
摘    要:目的:从人肝癌组织中克隆出人细胞分裂周期基因2( CDC2),并在大肠杆菌中表达CDC2蛋白。方法:从人肝癌组织中提取RNA,采用RT-PCR法扩增CDC2 cDNA,用DNA凝胶回收试剂盒纯化并回收RT-PCR产物,将RT-PCR产物插入pET28a(+)载体NdeⅠ和 XhoⅠ两酶切位点之间,转化大肠杆菌BL21(DE3);IPTG诱导表达人CDC2蛋白。结果:RT-PCR扩增出约894 bp的DNA片段,与GenBank中的CDC2基因序列完全一致。经限制性内切图谱和测序鉴定,成功构建了pET28a(+)/CDC2原核表达载体。SDS-PAGE分析结果显示人CDC2蛋白在大肠杆菌中得已表达。结论:从人肝癌组织中成功地扩增出CDC2基因,并在大肠杆菌中表达。

关 键 词:基因克隆  原核表达    
文章编号:1671-587X(2007)05-0834-03
收稿时间:2006-11-24
修稿时间:2006-11-24

Cloning,prokaryotic expression and identification of human cell division cycle gene 2
XU Bo,ZHENG Yong-chen,FEI Shao-yang.Cloning,prokaryotic expression and identification of human cell division cycle gene 2[J].Journal of Jilin University: Med Ed,2007,33(5):834-836.
Authors:XU Bo  ZHENG Yong-chen  FEI Shao-yang
Institution:1.Central Laboratory, Second Hospital,Jilin University,Changchun 130041,China; 2.Department of Neurosurgery,Third People’〖KG-*3〗s Hospital of Jilin Province,Siping 136000,China
Abstract:
Keywords:human cell division cycle gene 2  gene clone  prokaryotic expression
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