| 外周血中检测乳腺癌细胞株hMAM表达的方法探讨 |
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| 作者单位： | 浙江省绍兴市人民医院医学分子实验室 绍兴31200 |
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| 摘 要： | 目的建立逆转录结合荧光定量PCR(FQ-PCR)检测外周血乳腺癌细胞hMAM基因表达方法,了解其监测乳腺癌细胞微转移的应用价值。方法克隆目的片段,制备标准品并作测序验证。培养乳腺癌MDA-MB453、MCF7细胞株,制成血液标本模型,GAPDH基因为内对照,逆转录结合FQ-PCR检测乳腺癌细胞株血标本模型和10例乳腺癌患者外周血的hMAM表达。结果电泳和测序证实,克隆产物系预期的目的片段。FQ-PCR标准曲线的相关系数为-1.0;用103copies/μl标准品重复检测5次,x±s:718.9±120.5,CV16.7%;MDA-MB453细胞的血标本作灵敏度试验,相当于104个血细胞中含1个乳腺癌细胞可检出阳性。未检测到MCF7细胞的hMAM表达。10例乳腺癌患者,淋巴结转移的5例中,3例hMAM表达阳性、2例阴性;无淋巴结转移的5例中,1例hMAM表达阳性、4例阴性。结论本方法可有效监测外周血中微转移的乳腺癌细胞,发现不同乳腺癌细胞系hMAM表达程度差异大。
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| 关 键 词： | 乳腺癌 荧光定量聚合酶链反应 微转移 人乳房珠蛋白基因 |
The evaluation of the method detecting hMAM gene expression of breast cancer cell lines in peripheral blood |
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| DONG Xue-jun,ZHENG Zhuan,CHI Jian-jun. The evaluation of the method detecting hMAM gene expression of breast cancer cell lines in peripheral blood[J]. Zhejiang Journal of Laboratory Medicine, 2007, 0(1) |
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| Authors: | DONG Xue-jun ZHENG Zhuan CHI Jian-jun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Breast cancer Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction Micrometastasis Human mammaglobin gene |
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