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α7烟碱型受体兴奋剂、拮抗剂对胆管癌细胞侵袭能力的影响及机制
作者姓名:于成涛  刘广伟  孙志俭  卢云
作者单位:青岛大学附属医院黄岛院区,山东青岛266000
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81172031/H1606).
摘    要:
目的观察α7烟碱型受体兴奋剂尼古丁、拮抗剂银环蛇毒素(d.BTX)对胆管癌细胞侵袭能力的影响,并探讨机制。方法取对数期胆管癌细胞,去血清培养12h,取200μL浓度分别为0.5X10^5、1.0X10^5、1.5×10^5、2.0×10^5/mL的胆管癌细胞加入Transwell上室,下室加入10%血清的RPMll640培养液600μL,于12、24、36、48h观察侵袭细胞数。结果随细胞浓度及作用时间的增加,侵袭细胞数逐渐增加,但当浓度超过1.5×10^5/mL,时间超过36h后,侵袭细胞数增长缓慢,据此筛选出1.5X10^5/mL细胞浓度、作用时间36h用于后续实验。①取1.0×10^5/mL的胆管癌细胞加入Transwell上室,分为实验1、2、3、4组,分别加入尼古丁0、1×10^-2、1×10^-3、1×10^-4g/L,培养36h后0.1%结晶紫染色并于倒置显微镜下计数侵袭细胞数。②取1.0×10^5/mL的胆管癌细胞加入Tran.swell上室,分为实验1、2、3、4组,分别加入尼古丁0、1×10^-2、1×10^-2、1×10^-2g/L,α-BTX分别为2、2、4、6μ/mL,培养36h后0.1%结晶紫染色并于倒置显微镜下计数侵袭细胞数。结果单纯尼古丁作用后穿过基质胶的细胞数增多,实验1、2、3、4组细胞侵袭数分别为(17.90±1.70)、(25.56±1.02)、(26.03±1.32)、(23.22±1.24)个,实验1组与后三组比较,p均〈0.05;尼古丁联合a-'BTX共同作用后穿过基质胶的细胞数减少,实验1、2、3、4组细胞侵袭数分别为(16.89±1.27)、(18.16±0.89)、(18.20±1.46)、(18.15±2.01)个,实验1组与后三组比较,P均〈0.05。结论尼古丁可明显增强胆管癌细胞的侵袭能力,α-BTX可明显抵消尼古丁所产生的促侵袭能力,其机制可能通过改变斫烟碱型受体活性而发挥作用。

关 键 词:胆管癌  ct7烟碱型受体  尼古丁  银环蛇毒素
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