基于雌激素应答元件转录调节的药物筛选模型的建立 |
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引用本文: | 王玲巧,吕秋军,牛建昭,王继峰,曲艳燕,温利青,郑龙太,陈媛媛,张敏.基于雌激素应答元件转录调节的药物筛选模型的建立[J].中国中药杂志,2003,28(6):536-540. |
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作者姓名: | 王玲巧 吕秋军 牛建昭 王继峰 曲艳燕 温利青 郑龙太 陈媛媛 张敏 |
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作者单位: | 1. 北京中医药大学,细胞与生化实验室,北京,100029 2. 军事医学科学院,放射医学研究所,北京,100850 |
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基金项目: | 北京市自然科学基金项目 (70 3 2 0 2 4),国家中医药管理局中医药科学技术基金项目 (0 1 0 3ZP0 7) |
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摘 要: | 目的 :建立靶向雌激素应答元件 (ERE)的药物筛选模型 ,为筛选雌激素受体 (ER)配体奠定基础。方法 :构建重组报告基因载体 pERE-TAL-SEAP ,与对照载体 pCMVβ瞬时共转染表达人ERα或ERβ的Hela细胞株 ,观察化合物对SEAP报告基因表达活性的影响。结果 :雌二醇 (E2 )诱导表达人ERα或ERβ的Hela细胞株SEAP的表达 ,EC50分别为 (80.5 8± 8.51) pmol·L-1和 (10 3.90± 5.29) pmol·L-1,最大效应浓度为 10nmol·L-1;金雀黄素 (Gen)也诱导表达人ERα和ERβHela细胞株SEAP的表达 ,EC50 分别为 (39.38±2.26)nmol·L-1和 (10.86±0 .75 )nmol·L-1;最大效应浓度为 1μmol·L-1;E2 和Gen诱导SEAP表达的最大水平较对照孔细胞高 7~ 14倍。ER拮抗剂ICI182 ,780可完全抑制E2 和Gen对SEAP的诱导作用。结论 :利用此模型检测化合物诱导报告基因的表达水平可筛选和发现ER配体。
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关 键 词: | ERE ER 药物筛选 报告基因 |
文章编号: | 1001-5302(2003)06-0536-05 |
收稿时间: | 2002/10/21 0:00:00 |
修稿时间: | 2002年10月21 |
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