硫化氢对氧糖剥夺/复氧诱导小鼠脑皮层神经元损伤的体外观察 |
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作者姓名: | 伍吉云 魏慈照 徐悦青 刘路宽 张洋萍 魏楚蓉 刘星 罗友根 |
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作者单位: | 井冈山大学神经退行性疾病与衰老研究中心, 江西 吉安 343009 |
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基金项目: | 国家自然科学基金;江西省自然科学基金;江西省教育厅科研课题 |
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摘 要: | 目的 探讨硫化氢(H2S)对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导神经元损伤的影响。方法 小鼠皮层神经元用无糖厄尔氏平衡盐溶液(EBSS)于2% O2、5% CO2、93% N2 37℃培养4h,换用neurobasal + B27培养基于37℃ 5%CO2培养箱中继续培养12h,建立OGD/R模型。以硫氢化钠(NaHS)作为H2S的供体,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞存活率;用fura-2/AM和显微荧光成像系统检测神经元胞质钙离子浓度([Ca 2+ ]i);利用比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率;碘化丙啶(PI)染色检测细胞损伤。 结果 200、300与600 μmol/L NaHS预处理30min再OGD/R,神经元存活率显著提高(n=4);300 μmol/L NaHS预处理后再OGD/R,[Ca 2+]i(n=5)、LDH释放率(n=4)和细胞损伤率(n=6)均低于OGD/R组,且使用10 μmol/L钙螯合剂BAPTA也降低OGD/R诱导的LDH释放率和细胞损伤率。 结论 H2S减轻OGD/R所致皮层神经元损伤,其机制与H2S抑制OGD/R诱导神经元钙超载有关。
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关 键 词: | 氧糖剥夺/复氧 硫化氢 细胞损伤 钙超载 显微荧光成像 小鼠 |
收稿时间: | 2013-04-24 |
修稿时间: | 2013-06-13 |
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