胚胎玻璃化冷冻解冻技术对子代胚胎和胎盘中印记基因H19表达及甲基化水平的影响 |
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引用本文: | 马媛,陈书强,马夜肥,雷晖,文亮,王晓红. 胚胎玻璃化冷冻解冻技术对子代胚胎和胎盘中印记基因H19表达及甲基化水平的影响[J]. 生殖医学杂志, 2019, 0(9) |
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作者姓名: | 马媛 陈书强 马夜肥 雷晖 文亮 王晓红 |
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作者单位: | 中国人民解放军空军军医大学唐都医院妇产科生殖医学中心 |
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摘 要: | 目的建立玻璃化冷冻解冻移植小鼠模型,探究玻璃化冷冻解冻对子代胚胎及胎盘组织中印记基因H19表达及甲基化水平的影响。方法实验动物选择ICR清洁级小鼠,根据处理不同分为3组,自然妊娠(NC)组,胚胎体外培养(IVC)组和胚胎玻璃化冷冻解冻(VET)组,每组收集7只孕鼠。观测3组孕鼠孕9.5d的胎鼠存活率。取3组孕鼠孕9.5d的胚胎及胎盘标本,采用实时定量PCR技术分析H19基因在胎鼠及胎盘中的表达情况,采用焦磷酸测序技术检测H19基因在胎鼠和胎盘中的甲基化水平。结果 NC组的平均窝仔数(10.43±2.07)显著高于IVC组的(6.43±1.51)和VET组的(6.00±1.16)(P0.05)。IVC组和VET组的存活率分别为40.2%和37.5%,与NC组(100.0%)相比,具有显著性差异(P均0.05)。在胚胎组织中,与NC组相比,IVC组和VET组的H19表达水平显著增加(P0.05);在胎盘组织中,3组间H19基因的表达水平比较无显著性差异(P0.05);在胚胎和胎盘组织中,3组间H19基因甲基化水平比较均无显著性差异(P0.05)。结论胚胎的玻璃化冷冻解冻和胚胎体外培养均可导致小鼠存活率下降,胚胎中H19基因表达水平明显增高。但并未发现胎盘组织中H19基因水平的变化,且无论在胚胎或胎盘组织中,H19基因甲基化水平均未发现变化,后期需要更多的研究加以探索。
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关 键 词: | 印记基因 H19 玻璃化冷冻 小鼠模型 胎盘 |
Expression and methylation level of imprinted gene H19in fetuses and placentas derived from vitrified embryos |
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Abstract: | |
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