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| 驴皮药材RAPD分析方法建立及其与伪品马皮的鉴别 | |
| 引用本文： | 田俊生,史碧云,张福生,李晓伟,耿伟华,杨 永,刘会来,秦雪梅.驴皮药材RAPD分析方法建立及其与伪品马皮的鉴别[J].中草药,2013,44(3):354-358. |
| 作者姓名： | 田俊生 史碧云 张福生 李晓伟 耿伟华 杨 永 刘会来 秦雪梅 |
| 作者单位： | 1. 山西大学中医药现代研究中心,山西太原,030006 2. 山西大学中医药现代研究中心,山西太原030006;山西大学化学化工学院,山西太原030006 3. 保定赛行阿胶有限公司,河北保定,071404 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81102833);山西省基础研究项目(2012021031-2);山西省中药材、中药饮片地方标准研究(2011012A) |
| 摘 要： | 目的 建立驴皮药材RAPD分析方法并用于伪品马皮的鉴别.方法 采用化学试剂盒法确定了驴皮药材中DNA提取的最佳条件,采用L16(45)正交设计方法,针对Taq酶、Mg2+、dNTP、模板DNA、引物设计了5因素4水平的正交试验,优化了RAPD-PCR反应条件.结果 驴皮药材RAPD-PCR反应体系的最佳条件为25 μL反应体系中含有Taq酶1.5U、Mg2+0.15 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、模板DNA 1.5 μL、引物0.5 μmol/L;PCR反应条件为95℃预变性5 min,94℃变性30 s,37℃退火30s,72℃延伸1 min,共30个循环,最后72℃延伸7 min.RAPD反应结果中300～400 bp处的条带可作为鉴别驴皮及其伪品的特异性条带.结论 所建立的RAPD分析方法具有简便快捷、稳定性好、重现性高的特点,可用于驴皮药材及其伪品马皮的鉴别. |
| 关 键 词： | 驴皮 RAPD-PCR分析 正交设计 DNA分子标记 伪品鉴别 |
Establishment of RAPD for analysis on furs of Equus asinus and discrimination from Equus caballus orientalis |
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| TIAN Jun-sheng,SHI Bi-yun,ZHANG Fu-sheng,LI Xiao-wei,GENG Wei-hu,YANG Yong,LIU Hui-lai,QIN Xue-mei.Establishment of RAPD for analysis on furs of Equus asinus and discrimination from Equus caballus orientalis[J].Chinese Traditional and Herbal Drugs,2013,44(3):354-358. | |
| Authors: | TIAN Jun-sheng SHI Bi-yun ZHANG Fu-sheng LI Xiao-wei GENG Wei-hu YANG Yong LIU Hui-lai QIN Xue-mei |
| Institution: | 1.Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine,Shanxi University,Taiyuan 030006,China 2.College of Chemistry and Chemical Engineering,Shanxi University,Taiyuan 030006,China 3.Baoding Saixing E-jiao Co.,LTD,Baoding,Baoding 071404,China |
| Abstract: | |
| Keywords: | Equus asinus L RAPD-PCR analysis orthogonal design DNA molecular marker fake identification |
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