|
|||||
|
|
| 幽门螺杆菌TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR检测方法的建立北大核心CSCD | |
| 作者姓名： | 荣倩玉 陈醒醒 刘艺凝 徐正 丁雲飞 吴玉龙 季晓飞 张莹 李波清 |
| 作者单位： | 1.滨州医学院病原生物学教研室264003;2.东营市胜利第一中学; |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.81471561；No.81501718；No.81702054；No.81771709)；山东省自然科学基金项目(No.ZR2017BC011)；滨州医学院青年骨干教师培养计划经费资助项目 |
| 摘 要： | 目的建立用于幽门螺杆菌快速定量检测和分型的TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR方法。方法采用Primer Premier 5软件分析设计引物和探针,采用双重荧光定量PCR扩增幽门螺杆菌CagA和VacA基因片段,建立循环数与拷贝数关系的标准曲线。检测临床标本中所含幽门螺杆菌的循环数,用该方法对临床胃黏膜标本进行检测并与标准曲线对比,计算所含幽门螺杆菌的拷贝数。结果建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR方法检测幽门螺杆菌质粒的线性范围是10~2~10~8拷贝/μl,CagA和VacA基因标准曲线的相关系数分别是0.977 8和0.990 4。29份临床胃黏膜标本的CagA和VacA基因循环数Ct值分别在29~35和30~35之间,幽门螺杆菌拷贝数分别在1.0×10^(1.39)~1.0×10^(3.87)和1.0×10^(3.06)~1.0×10^(3.91)之间,且临床标本中的幽门螺杆菌均为I型。结论建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR法具有敏感、精确、快速的特点,可用于幽门螺杆菌的快速定量检测与分型鉴定。 |
| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 CagA VacA MGB双重荧光定量PCR技术 |
| 本文献已被 维普 等数据库收录！ | |