| 人肌腱与皮肤组织及其细胞中Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达的比较研究 |
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| 作者姓名： | 许锋 刘伟 曹德君 翟华玲 魏娴 崔磊 曹谊林 |
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| 作者单位： | 上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程重点实验室,上海,200011;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程重点实验室,上海,200011;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程重点实验室,上海,200011;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程重点实验室,上海,200011;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程重点实验室,上海,200011;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程重点实验室,上海,200011;上海第二医科大学第九人民医院整复外科,上海市组织工程重点实验室,上海,200011 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划),上海市重点学科项目 |
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| 摘 要： | 目的探讨利用皮肤成纤维细胞作为肌腱构建种子细胞的可行性.方法取外伤病人术中修剪的多余肌腱和皮肤组织,一部分用于石蜡包埋做组织学检测,一部分用酶消化法培养细胞,取第2代细胞进行细胞学检测.本实验采用偏光显微镜、免疫组织化学技术对人正常肌腱组织和皮肤组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达进行比较;采用免疫细胞化学、免疫细胞荧光、RT-PCR 技术从蛋白水平、RNA水平比较第2代人肌腱细胞和皮肤成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原的情况.结果偏光显微镜下可见肌腱组织中以粗大的Ⅰ型胶原为主,而皮肤组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原交错排列.免疫组织化学和显示石蜡包埋的肌腱组织和皮肤组织的Ⅰ型胶原染色均为强阳性,肌腱组织Ⅲ型胶原染色阴性,皮肤组织Ⅲ型胶原染色阳性.免疫细胞化学和免疫细胞荧光显示第2代肌腱细胞和皮肤成纤维细胞Ⅰ、m型胶原染色均为阳性.RT-PCR灰度分析结果示肌腱组织和皮肤组织Ⅰ型胶原灰度比值为1.25±0.03,Ⅲ型胶原肌腱组织不表达.第2代肌腱细胞与皮肤成纤维细胞Ⅰ型胶原灰度比值为1.09±0.05,Ⅲ型胶原灰度比值为0.93 ±0.08.结论人正常肌腱组织和皮肤组织中在胶原组成上均以Ⅰ型胶原为主.第2代人肌腱细胞和皮肤成纤维细胞的生物学特性相近,均合成Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原.皮肤成纤维细胞很有可能成为肌腱组织工程新的种子细胞.
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| 关 键 词： | 肌腱 皮肤 肌腱细胞 皮肤成纤维细胞 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原 |
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