铜绿假单胞菌氨基糖苷类药物产酶耐药机制研究

目的了解我院临床分离的30株多重耐药铜绿假单胞菌中16SrRNA甲基化酶基因及氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因存在状况。方法收集山东和江苏两地医院临床分离的铜绿假单胞菌共50株（山东烟台多重耐药30株，江苏泛耐株20株），采用聚合酶链反应（PCR）及序列分析的方法分析6种16SrRNA甲基化酶（armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、npmA）和6种AMEs基因aac（3）．Ⅰ、aac（3）-Ⅱ、aac（6’）-Ⅰb、aac（6’）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ和ant（2″）-Ⅰ。结果山东烟台30株多重耐药铜绿假单胞菌中4种基因aac（3）-Ⅱ、aac（6＇）-Ⅱ、ant（3″）-Ⅰ和ant（2″）-Ⅰ的阳性株数分别为6株（20％）、14株（46．7％）、11株（36．7％）和1株（3.3％），其余8株基因均为阴性；AMEs基因总阳性率为50％（15／30）。江苏20株泛耐株中6种基因rmtB、aac（3）-Ⅱ、aac（6＇）-Ⅰb、aac（6’）-Ⅱ、ant（3’r）-Ⅰ和ant（2″）-Ⅰ的阳性株数分别为11株（55％）、12株（60％）、7株（35％）、12株（60％）、10株（50％）和9株（45％），其余6株基因均为阴性；AMEs基因总阳性率为95％（19／20）。结论铜绿假单胞菌存在16SrRNA甲基化酶基因为国内首次报道；铜绿假单胞菌AMEs基因携带率很高；二家医院检出酶基因种类有差别。

Research of mechanism of enzyme-producing and drug resistance of pseudamonas aeruginosa

Objeetive To investigate the 16SrRNA methylases gene and AMES of 30 strains of multi-resistant pseudomonas aeruginosa isolatted from patients in our hospital. Methods Collecting 50 strains of pseudomonas aeruginosa from two hospitals（30 strains of multi-resistant pseudomonas aeruginosa from Yantai,Shandong,20 strains of pan-drugresistant from Jiangsu）, and analysing 6 kinds of 16SrRNA methylases （armA, rmtA, rmtB, rmtC, rmtD, npmA） and 6 kinds of AMEs gene aac（3）-Ⅰ ,aac（3）-Ⅱ, aac（6＇）- Ⅰ b, aac（6＇）- Ⅱ, aac（3″）- Ⅰ ,and aac（2″）- Ⅰ by PCR and sequence analysis. Results In 30 strains of multi-resistant pseudomonas aeruginosa from Yantai, the positive rate of 4 kinds of genes aac（3）-Ⅱ, aac（6＇）-Ⅱ, aac（3″）-Ⅰ, and aac（2″）-Ⅰ were 20%（6/30）, 46.7%（14/30）, 36.7%（11/30） and 3.3%（1/30） separetely. The 8 kinds of the rest genes were all tested negative. The total positive rate of AMEs gene was 46.7% （14/30）. In 20 strains of pandrugresistant from Jiangsu, the positive rate of 4 kinds of genes aac（3）- Ⅱ, aac（6＇）-Ⅱ, aac（3″）-Ⅰ, and aac（2″）-Ⅰ were 55%（11/20）, 60%（12/20）, 35%（7/20） and 60% （12/20）, 50%（10/20）, 45% （9/20） separetely. The 6 kinds of the rest genes were all tested negative. The total positive rate of AMEs gene was 95% （19/20）. Conclusions It is the first report that 16SrRNA methylases gene existed in pseudamonas aeruginosa; There was very high positive rate of AMEs genotypes in pseudamonas aeruginosa; There was different gene from two hospitals.