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氟脲嘧啶诱导Egr-1启动子转录调控Flt3配基的基因表达
引用本文:杜楠,裴雪涛,周进明,孙君重,郝怡鑫. 氟脲嘧啶诱导Egr-1启动子转录调控Flt3配基的基因表达[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2009, 25(5)
作者姓名:杜楠  裴雪涛  周进明  孙君重  郝怡鑫
作者单位:1. 解放军总医院第一附属医院肿瘤科,北京,100037
2. 军事医学科学院九所,北京,100850
基金项目:国家自然科学基金,解放军总医院第一附属医院新技术重大项目 
摘    要:
目的:探讨5-氟脲嘧啶(5-Fu)诱导Egr-1启动子调控造血生长因子基因表达对化疗后造血损伤的恢复作用.方法:构建携带Egr-1调控序列启动的Flt3 配基(FL)和EGFP双顺反子基因pCIneo真核表达载体(Egr-EF);通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL并称为HFCL/EF;采用流式细胞术和倒置荧光显微镜观察EGFP绿色荧光表达的阳性细胞;采用RT-PCR、 Western blot和ELISA检测5-Fu对HFCL/EF细胞FL表达的影响;流式细胞术检测经5-Fu处理的HFCL/EF细胞上清对CD34 +细胞和CFU-GM的增殖作用;采用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸鉴定化疗通过活性氧诱导Egr-1启动子CArG序列调控下游基因表达的特异性.结果:构建了Egr-1调控序列启动的双顺反子基因表达载体(Egr-EF);经5-Fu处理后HFCL/EF细胞培养上清液较未加5-Fu组的FL含量明显增高并且对CD34 +细胞和CFU-GM具有较强的扩增作用( P <0.01);在5-Fu处理的HFCL/EF细胞中, EGFP活性、 FL mRNA和FL蛋白表达增强, 而且, N-乙酰半胱氨酸明显减少FL含量.结论:5-Fu诱导Egr-1启动子调控的造血生长因子基因表达对化疗药物处理后的造血损伤具有一定的恢复作用.

关 键 词:5-氟脲嘧啶  Flt3配基  骨髓基质细胞  活性氧中间物

Effects of fluorouracil-induced Flt3 Ligand gene expression transcriptional regulated by Egr-1 promoter sequences
DU Nan,PEI Xue-tao,ZHOU Jin-ming,SUN Jun-zhong,HAO Yi-xin. Effects of fluorouracil-induced Flt3 Ligand gene expression transcriptional regulated by Egr-1 promoter sequences[J]. Chinese journal of cellular and molecular immunology, 2009, 25(5)
Authors:DU Nan  PEI Xue-tao  ZHOU Jin-ming  SUN Jun-zhong  HAO Yi-xin
Abstract:
Keywords:Egr-1
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