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| TGFβ1正、反义基因转染60Co照射HELF对TGFβ1及I型前胶原mRNA表达调控影响 | |
| 引用本文： | 刘纯杰,王德文,高亚兵,熊呈琦,彭瑞云,崔雪梅,宋良文,张兆山,龙建银,王会信.TGFβ1正、反义基因转染60Co照射HELF对TGFβ1及I型前胶原mRNA表达调控影响[J].中华放射医学与防护杂志,2001,21(2). |
| 作者姓名： | 刘纯杰 王德文 高亚兵 熊呈琦 彭瑞云 崔雪梅 宋良文 张兆山 龙建银 王会信 |
| 作者单位： | 1. 北京放射医学研究所;北京生物工程研究所 2. 北京放射医学研究所 3. 北京生物工程研究所 4. 北京基础医学研究所 |
| 基金项目： | 全军九五指令基金资助项目! (96L0 11) |
| 摘 要： | 目的 观察TGFβ1正、反义基因转染6 0 Coγ射线照射的HELF后对其TGFβ1mRNA及Ⅰ型前胶原mRNA表达调控的影响。方法 采用脂质体介导法进行基因稳定转染 ,转染细胞经PCR ,DNAdotblot鉴定和RNAdotblot分析。结果 选择 5Gy照射细胞 ,采用LipofectAMINE将TGFβ1正、反义基因表达载体pMAMneo TGFβ1和pMAMneo AntiTGFβ1转入HELF ,转染细胞经G418抗性筛选出来 ,并且在糖皮质激素地塞米松诱导下培养。提取培养细胞的RNA和染色体DNA ,转染细胞DNA与地高辛标记的neo特异探针杂交阳性 ,且可用neo基因特异的PCR引物扩增出 2 76bp的阳性片段。对提取的RNA用地高辛标记的TGFβ1探针和α1(Ⅰ )寡核苷酸探针经RNAdotblot分析表明 ,转染pMAMneo AntiTGFβ1的细胞其TGFβ1mRNA水平下降 ,而转染pMAMneo TGFβ1的细胞其TGFβ1mRNA水平则升高。对于Ⅰ型前胶原mRNA ,前者表达水平比未转染细胞低 ,后者则略高。 结论 TGFβ1反义基因转染6 0 Coγ射线照射的人胚肺成纤维细胞后可以使细胞中TGFβ1mRNA含量水平减少 ,使Ⅰ型前胶原mRNA表达水平降低 |
| 关 键 词： | TGFβ1 基因转染 |
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