| GFP示踪FLAG抗原表位标记BMP2转基因腺病毒穿梭质粒的构建 |
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| 引用本文： | 张正,李谌,陈峻江,刘丹平.GFP示踪FLAG抗原表位标记BMP2转基因腺病毒穿梭质粒的构建[J].山东医药,2011,51(10):1-3. |
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| 作者姓名： | 张正 李谌 陈峻江 刘丹平 |
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| 作者单位： | 辽宁医学院附属第一医院,辽宁锦州,121001 |
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| 基金项目： | 辽宁省自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建同时表达具有抗原表位FLAG标记的重组人骨形态发生蛋白2（rhBMP2）目的蛋白和示踪绿色荧光蛋白（GFP）报告分子的腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2＋-IRES-hrGFP-1。方法采用PCR技术对pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因诱变,去除翻译终止密码子后的基因序列并添加新的酶切识别位点XhoⅠ。测序检测诱变情况,将诱变后的BMP2基因定向导入pShuttle CMV-IRES-hrGFP-1,将质粒分别转染人胚肾细胞HEK293A和兔骨髓间充质干细胞（MSCs）。通过限制性内切酶酶切图谱分析该质粒;采用荧光显微镜检查和免疫组化SP法测定HEK293A中的GFP和MSCs中的BMP2,行重组腺病毒穿梭质粒鉴定。结果质粒pShuttle CMV-BMP2＋-IRES-hrGFP-1经双酶切鉴定图谱分析构建正确,HEK293A、MSCs中均有GFP和BMP2表达。结论 pShuttle CMV-BMP2＋-IRES-hrGFP-1构建成功。
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| 关 键 词： | 骨形态发生蛋白2 重组腺病毒 质粒 绿色荧光蛋白 抗原表位 |
Construction and identification of recombinant adenovirus shuttle plasimid expressing FLAG labeled BMP2 and traced by GFP |
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| ZHANG Zheng,LI Chen,CHEN Jun-jiang,LIU Dan-ping.Construction and identification of recombinant adenovirus shuttle plasimid expressing FLAG labeled BMP2 and traced by GFP[J].Shandong Medical Journal,2011,51(10):1-3. |
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| Authors: | ZHANG Zheng LI Chen CHEN Jun-jiang LIU Dan-ping |
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| Institution: | (First Affiliated Hospital of Liaoning Medical University,Jinzhou 121001,P.R.China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bone morphogenetic protein 2 recombinant adenovirus vector plasimid green fluorescent protein epitope |
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