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表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型的建立
引用本文:张三泉,蒋会勇,韩西群,胡海,张进华,姚开泰,赵彤. 表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型的建立[J]. 广东医学, 2005, 26(12): 1629-1631
作者姓名:张三泉  蒋会勇  韩西群  胡海  张进华  姚开泰  赵彤
作者单位:南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;南方医科大学南方医院病理科,广州,510515;南方医科大学南方医院病理科,广州,510515
基金项目:国家自然科学基金资助项目(编号:30270739),全军医药卫生科研基金资助项目(编号:300000M201)
摘    要:
目的建立表达人KIAA1173基因的鼻咽癌6-10B细胞模型,为探究人KIAA1173基因在鼻咽癌发病机制中的作用奠定实验基础。方法从新鲜肌肉组织中提取总RNA,采取逆转录PCR(RT-PCR)得到人KI-AA1173基因cDNA,纯化PCR产物,与真核表达载体pcDNA3.1( )连接,转化,铺板,筛选阳性克隆,酶切鉴定并进行序列测定。将重组质粒pcDNA3.1( )-KIAA1173和空载体利用阳离子脂质体介导转入鼻咽癌6-10B细胞,经G418筛选阳性克隆。用RT-PCR、原位杂交及免疫细胞化学方法检测KIAA1173基因在6-10B细胞中的稳定表达情况。以空白质粒转染组作为对照。结果重组质粒pcDNA3.1( )-KIAA1173经酶切和DNA测序分析显示与GenBank所公布的相应序列相符,插入方向正确,阅读框架完整。转染KIAA1173基因的6-10B细胞阳性克隆在mRNA和蛋白水平证实,转染细胞内有该基因高表达,表明细胞可表达人KIAA1173基因。结论成功获得了人KIAA1173基因全长cDNA的基因克隆,将该基因导入鼻咽癌6-10B细胞后,获得生物学活性稳定的KIAA1173基因高表达的细胞模型。

关 键 词:KIAA1173基因  鼻咽肿瘤  转染  细胞模型
修稿时间:2005-07-18

Establishment of stable human nasopharyngeal carcinoma 6-10 B cell line overexpressing KIAA 1173 gene
Abstract:
Keywords:
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