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大鼠椎体生长板软骨细胞的改良培养及传代特征
引用本文:李涛,陈建庭,朱青安,许子星,查丁胜,刘富强,巫松辉,吴骞,肖文德. 大鼠椎体生长板软骨细胞的改良培养及传代特征[J]. 中国矫形外科杂志, 2011, 19(2): 136-140
作者姓名:李涛  陈建庭  朱青安  许子星  查丁胜  刘富强  巫松辉  吴骞  肖文德
作者单位:南方医科大学南方医院脊柱骨病科,广州市,510515
摘    要:[目的]建立体外培养及鉴定大鼠椎体生长板软骨细胞的方法,观察软骨细胞的传代特征.[方法]采用改良胰酶和Ⅱ型胶原酶序贯消化法对4只1周龄SD大鼠椎体生长板软骨细胞进行体外分离、培养.原代细胞传代后采用细胞HE染色和甲苯胺蓝染色对软骨细胞进行鉴定,采用MTT比色法绘制细胞生长曲线.将细胞传代至第6代,采用倒置相差显微镜观察各代软骨细胞的形态,采用免疫细胞化学染色鉴定各代软骨细胞Ⅱ型胶原的表达.[结果]MTT比色法显示,传3代以前的软骨细胞的生长曲线近似"S"形,从第4 d开始细胞呈对数生长,第9 d达平台期,至第11 d开始出现生长抑制.体外培养的软骨细胞随着传代次数的增加,细胞形态由原代的多角形逐渐变为长梭形.传3代以前的软骨细胞Ⅱ型胶原免疫细胞化学呈强阳性.[结论]本研究所采用的软骨细胞分离和培养方法,能在短时间内获得高纯度的软骨细胞,传3代及以前的细胞具有软骨细胞的特征性表型,增殖较快,这一方法为更深入地从细胞水平研究椎体的纵向生长奠定了基础.

关 键 词:椎体生长板  软骨细胞  细胞培养

Improved culture of chondrocytes from rat vertebral body growth plate and their passage characteristics
LI Tao,CHEN Jian-ting,ZHU Qing-an,et al.. Improved culture of chondrocytes from rat vertebral body growth plate and their passage characteristics[J]. Orthopedic Journal of China, 2011, 19(2): 136-140
Authors:LI Tao  CHEN Jian-ting  ZHU Qing-an  et al.
Affiliation:LI Tao,CHEN Jian-ting,ZHU Qing-an,et al.Department of Spinal and Orthopedic Surgery,Nanfang Hospital,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China
Abstract:
Keywords:vertebral body growth plate  chondrocytes  cell culture  
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