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| 穿膜肽-EGFP融合蛋白的表达、纯化与鉴定 | |
| 引用本文： | 周洁,郭晓云,冷静,万彦彬. 穿膜肽-EGFP融合蛋白的表达、纯化与鉴定[J]. 基础医学与临床, 2010, 30(9): 902-906 |
| 作者姓名： | 周洁 郭晓云 冷静 万彦彬 |
| 作者单位： | 1. 广西医科大学,第一附属医院泌尿外科,广西,南宁,530021 2. 广西医科大学,第一附属医院消化内科,广西,南宁,530021 3. 广西医科大学,第一附属医院免疫学教研室,广西,南宁,530021 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，中国博士后科学基金 |
| 摘 要： | 目的 构建EGFP-CPPs融合基因载体，表达、纯化并鉴定EGFP-CPPs融合蛋白。方法 通过碱基合成的方法合成含有CPPs基因序列的EGFP上游引物，PCR扩增后收集CPPs-EGFP融合基因片段并电泳鉴定，将融合基因表达载体转染大肠杆菌并扩增表达，收集表达蛋白后过层析柱纯化，蛋白电泳检测表达蛋白分子量，蛋白飞行质谱分析检测蛋白序列，体外细胞实验验证其穿膜功能。结果 电泳检测可见与CPPs-EGFP分子量对应的电泳条带，构建质粒测序含有目的基因序列。蛋白电泳检测到纯度较高的融合蛋白，其蛋白序列与目的序列一致。体外细胞实验证实了融合蛋白的穿膜功能。结论 成功制备了具有穿膜功能的CPPs-EGFP融合蛋白，为其促进抗体-蛋白微球偶联物进入肿瘤细胞发挥治疗作用的研究奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 穿膜肽 增强型绿色荧光蛋白 膀胱肿瘤 |
| 收稿时间： | 2009-06-12 |
| 修稿时间： | 2009-12-14 |
Expression, purification and identification of CPPs-EGFP fusion protein |
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| ZHOU Jie,GUO Xiao-yun,LENG Jing,WAN Yan-bin. Expression, purification and identification of CPPs-EGFP fusion protein[J]. Basic Medical Sciences and Clinics, 2010, 30(9): 902-906 | |
| Authors: | ZHOU Jie GUO Xiao-yun LENG Jing WAN Yan-bin |
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