低蛋白配伍α酮酸饮食可直接影响肾损伤大鼠系膜细胞肾素-血管紧张素系统表达

目的 观察肾损伤大鼠低蛋白配伍α酮酸饮食后是否可直接影响肾小球系膜细胞外基质（ECM）的产生和局部肾素-血管紧张素系统（RAS）的表达。 方法 30只雄性SD大鼠建立3/4肾切除模型，分组如下（均n=10）：正常蛋白饮食组（NPD，18%酪蛋白）、低蛋白饮食组（LPD，6.5%酪蛋白）和低蛋白配伍α酮酸饮食组（LK，5.4%酪蛋白+1% α酮酸）。另取10只大鼠行假手术后给予正常蛋白饮食作为对照组（sham）。12周后麻醉处死大鼠，收集各组动物血清。取10%浓度的血清干预体外培养的系膜细胞48 h。采用ELISA法检测细胞上清液中血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、转化生长因子β1（TGF-β1）及纤连蛋白（FN）的水平。采用Western印迹法和实时定量PCR法检测系膜细胞血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）、FN及TGF-β1的蛋白和基因表达。 结果 （1）动物实验：各组大鼠体质量、血清总蛋白及白蛋白水平差异均无统计学意义，肾切除各组大鼠血肌酐及尿蛋白水平均显著高于sham组（均P < 0.05）。血肌酐水平在肾切除组间差异无统计学意义，但LPD组血尿素氮及尿蛋白水平显著低于NPD组（均P < 0.05），而LK组更低（均P < 0.05）。（2）细胞实验：NPD血清干预组细胞分泌AngⅡ水平[（12.70±0.12） mg/g蛋白比（8.04±0.62） mg/g蛋白]及AT1R基因和蛋白表达水平均显著高于sham组，同时伴有FN[（39.84±0.06） g/g蛋白比（20.58±0.46） g/g蛋白]及TGF-β1[（83.85 ± 3.58） mg/g蛋白比（10.12±0.56）mg/g]基因转录和分泌水平的上升（均P < 0.05）；LPD及LK血清干预组可显著抑制上述改变（均P < 0.05）。应用RAS阻断剂氯沙坦可显著降低NPD组中FN及TGF-β1的合成与分泌，对LPD组中二者的表达也有进一步的抑制作用（均P < 0.05），但对LK组无明显影响。 结论 低蛋白配伍α酮酸饮食可维持肾切除大鼠营养平衡，直接抑制系膜细胞RAS的表达，减少细胞外基质的分泌，从而发挥肾脏保护作用。