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程序性细胞死亡蛋白5在米非司酮诱导前列腺癌细胞凋亡中的协同作用
引用本文:于靖,邹海峰,裴天仙,林平,王爽,姜雪,于晓光. 程序性细胞死亡蛋白5在米非司酮诱导前列腺癌细胞凋亡中的协同作用[J]. 肿瘤, 2010, 30(7). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2010.07.003
作者姓名:于靖  邹海峰  裴天仙  林平  王爽  姜雪  于晓光
作者单位:1. 天津市胸科医院检验科,天津,300051;哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室,哈尔滨,150081
2. 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室,哈尔滨,150081
3. 天津药物研究院新药安全评价研究中心,天津,300193
基金项目:黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目计划,哈尔滨市科技创新人才研究专项资金项目 
摘    要:
目的:观察程序性细胞死亡蛋白5(programmed cell death 5,PDCD5)在米非司酮(mifepristone,MIF)诱导的前列腺癌细胞凋亡中的作用,并探讨其机制.方法:MTT法检测不同浓度(5、10、20、50、100 μmol/L)的MIF作用前列腺癌PC-3M细胞24~96 h后的吸光度(D)值,找到最佳作用时间及浓度.将真核表达载体PCI-neo-PDCD5用脂质体介导的方法转染入PC-3M细胞后,采用细胞免疫荧光法检测PDCD5蛋白的表达水平.在转染PDCD5基因的细胞中加入最佳作用浓度的MIF,继续培养24、48 h后,采用TUNEL和吖啶橙(acrine orange,AO)/溴化乙锭(ethidium bromide,EB)法检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白caspase-3的表达变化.结果:MTT检测结果显示,与对照组相比,5、10 μmol/L MIF组的D值没有显著变化(P>0.05),20、50和100 μmol/L MIF组的D值显著降低(P<0.05),说明MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈时间和剂量依赖性.PDCD5基因真核表达载体成功转染入PC-3M细胞,并得到高表达.TUNEL和AO/EB检测结果显示,与对照组及单独应用MIF组相比,转染PDCD5基因并加入MIF后的细胞凋亡率显著增加(P<0.01);Western印迹结果显示,caspase-3蛋白在PDCD5与MIF联合作用时的表达明显增加(P<0.01).结论:外源性PDCD5在MIF诱导的前列腺癌细胞凋亡中有明显的正协同作用,推测其有望成为前列腺癌临床治疗的一个辅助药物.

关 键 词:前列腺肿瘤  细胞凋亡  凋亡调节蛋白质类  米非司酮  转染  基因,PDCD5

The synergistic effects of programmed cell death 5 (PDCD5) protein in the apoptosis of prostate cancer cells induced by mifepristone
YU Jing,ZOU Hai-feng,PEI Tian-xian,LIN Ping,WANG Shuang,JIANG Xue,YU Xiao-guang. The synergistic effects of programmed cell death 5 (PDCD5) protein in the apoptosis of prostate cancer cells induced by mifepristone[J]. Tumor, 2010, 30(7). DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2010.07.003
Authors:YU Jing  ZOU Hai-feng  PEI Tian-xian  LIN Ping  WANG Shuang  JIANG Xue  YU Xiao-guang
Affiliation:YU Jing1,2,ZOU Hai-feng2,PEI Tian-xian3,LIN Ping2,WANG Shuang2,JIANG Xue2,YU Xiao-guang2(1.Department of Clinical Laboratory,Tianjin Chest Hospital,Tianjin 300051,China,2.Department of Biochemistry and Molecular Biology,Harbin Medical University,Harbin 150081,3.Center for New Drug Safety Evaluation & Reseach,Tianjin Institute of Pharmaceutical Research,Tianjin 300193,China)
Abstract:
Keywords:Prostatic neoplasms  Apoptosis  Apoptosis regulatory proteins  Mifepristone  Transfection  Gene  PDCD5  
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