| 1种用于分析疾病相关ABO抗原丢失的染色体杂合性缺失方法 |
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| 引用本文： | 许先国,应燕玲,洪小珍,蓝小飞,马开荣,陈舒,朱发明,吕杭军. 1种用于分析疾病相关ABO抗原丢失的染色体杂合性缺失方法[J]. 中国输血杂志, 2012, 0(10): 1046-1049 |
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| 作者姓名： | 许先国 应燕玲 洪小珍 蓝小飞 马开荣 陈舒 朱发明 吕杭军 |
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| 作者单位： | 浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室,浙江杭州,310006 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金(项目编号：Y2101289,Y12H080002)浙江省卫生高层次创新人才培养项目 |
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| 摘 要： | 目的 建立1种9号染色体杂合性缺失(LOH)的分析方法,以解释因ABO基因附近染色体的LOH导致的疾病相关ABO抗原丢失现象.方法 在9号染色体长臂和短臂上共选取13个微卫星位点,其中10个位点(D9S1677、D9S289、D9S1776、D9S1682、D9S290、D9S164、D9S1818、D9S1826、D9S158、D9S1838)位于ABO血型基因近端,平均间距5.52 cM；另3个位点(D9S1858、D9S171、D9S1843)位于ABO基因远端,平均间距39.3 cM.分别设计合成FAM和HEX荧光标记引物,优化PCR扩增后,以聚丙烯酰胺凝胶毛细管电泳,通过GeneMapper软件分析微卫星不稳定性,观察染色体LOH发生情况.结果 13个微卫星位点均得到了较好的PCR扩增效果,PCR产物长度在75～273 bp之间,各位点均有较高的杂合度,适合于微卫星片段长度分析.13个位点可在2个泳道中进行双荧光同步分析,各位点不同等位基因间互不干扰.分别对1例正常血型标本和2例血液病相关的ABO抗原变异标本(包括口腔黏膜DNA和外周血DNA)进行微卫星分析,正常血型标本的口腔DNA和外周血DNA未发现染色体LOH现象.而2例ABO抗原变异标本,与口腔黏膜DNA相比,外周血DNA均存在不同程度的LOH现象,表明ABO抗原丢失可能源于血液系统疾病相关的9号染色体LOH现象.结论 建立了1种基于微卫星不稳定分析的9号染色体LOH方法,可用于血液系统疾病相关的ABO抗原丢失标本分子机制的研究.
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| 关 键 词： | ABO血型 血液病 染色体 杂合性缺失 |
Analysis of ABO antigen variants related to hematological diseases using chromosomal loss of heterozygosity technique |
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