抑制MS-1细胞Clock基因表达引起DNA甲基化水平降低

【摘要】 目的 探讨Clock基因对MS 1细胞甲基化水平的影响及Clock基因参与调控细胞增殖的机制。方法 采用siRNA干扰MS 1细胞Clock基因表达,检测细胞DNA甲基化水平变化,以及甲基化结合蛋白MECP2,影响细胞生长和增殖的Wnt/β Catenin信号通路β Catenin基因的表达情况。结果 与对照组相比,抑制Clock基因表达后,MS 1细胞甲基化水平显著降低,且Mecp2和β Catenin基因的表达均明显减少。抑制Clock基因组（CK）和阴性对照组（NC）甲基化DNA占总DNA比率分别为：(1067±0034)%和(1983±0154)%。Real time PCR结果表明,CK组β Catenin基因相对表达量为100000±009547,NC组为162584±017167;CK组Mecp2为098824±012243,NC组为180979±018520。Western blot结果显示,CK组β CATENIN/β TUBLLIN的相对IOD值为1093368±0214433,NC组为3305374±0260016;CK组MECP2/β TUBLLIN的相对IOD值为0289546±0104738,NC组为0649544±0140909。结论 Clock基因能够影响细胞甲基化水平,并且可能通过调控甲基化结合蛋白MECP2表达和Wnt/β Catenin信号通路影响细胞增殖。