| 巢式甲基化特异性聚合酶链反应在p16基因启动子过甲基化检测中的应用 |
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| 引用本文： | 姚群峰,康新江,宁勇,唐朝晖,周宜开. 巢式甲基化特异性聚合酶链反应在p16基因启动子过甲基化检测中的应用[J]. 中华检验医学杂志, 2004, 27(2): 89-92 |
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| 作者姓名： | 姚群峰 康新江 宁勇 唐朝晖 周宜开 |
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| 作者单位： | 430030,武汉,华中科技大学同济医学院公共卫生学院环境医学研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重大项目基金资助 (3 9990 5 70 ) |
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| 摘 要： | ![]()
目的 介绍巢式甲基化特异性聚合酶链反应 (nMSP)法 ,探讨了最佳PCR扩增条件 ,并用该法分析新鲜癌组织、石蜡包埋组织及肿瘤患者血清中p16基因启动子的甲基化状态。方法 将基因组DNA变性成为单链 ,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA ,将所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶 ,而甲基化的胞嘧啶则不变。设计针对甲基化和非甲基化等位基因特异引物 ,进行巢式聚合酶链反应扩增 ,最后经凝胶电泳检测目的片段。结果 在 3种类型的标本中都检测出了p16基因启动子甲基化。用甲基化特异性聚合酶链反应法 (MSP)和nMSP法分别检测 34例非小细胞肺癌 (NSCLC)患者血清 ,p16基因启动子甲基化阳性率分别为 5 3% (18/34)和 74 % (2 5 /34) ,nMSP法具有更高的灵敏度。结论 筑巢式甲基化特异性聚合酶链反应是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法 ,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化分析。
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| 关 键 词： | 甲基化 基因p16 聚合酶链反应 |
| 修稿时间： | 2003-05-28 |
Detection of p16 promoter hypermethylation by nested methylation specific polymerase chain reaction |
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| Abstract: | ![]()
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| Keywords: | Methylation Genes p16 Polymerase chain reaction |
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