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Survivin shRNA真核表达载体的构建及其生物学作用
引用本文:谢富华,吴小云,王润秀,熊亮,梁念慈.Survivin shRNA真核表达载体的构建及其生物学作用[J].第四军医大学学报,2008,29(12):1104-1107.
作者姓名:谢富华  吴小云  王润秀  熊亮  梁念慈
作者单位:1. 赣南医学院,生物化学与分子生物学教研室,江西赣州341000;广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江524023
2. 赣南医学院,生物化学与分子生物学教研室,江西赣州341000
3. 赣南医学院,第一附属医院肾病/风湿科,江西赣州341000
4. 赣南医学院,预防医学教研室,江西赣州341000
5. 广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江,524023
摘    要:目的:构建存活素(survivin)基因短发夹RNA(shR-NA)的表达质粒,为乳腺癌RNAi介导的基因治疗打下基础.方法: 设计并合成有小发夹结构的8条survivin shRNA对应模板序列,退火并与pShuttle 1.0-CMV载体重组质粒;将重组质粒转染人乳腺癌细胞MCF-7;MTT实验筛选出最有效质粒及其有效浓度,流式细胞术检测细胞周期的变化,经Hcechst染色观察凋亡情况,RT-PCR和Westem Blot检测survivin基因的表达情况.结果: 成功构建重组质粒并筛选出最有效质粒及其有效浓度;细胞受阻于G2/M期,并通过荧光染色发现有凋亡细胞;survivin基因表达受到抑制.结论: 构建的重组质粒能抑制survivin基因的表达,这为研究乳腺癌RNAi介导的基因治疗打下基础.

关 键 词:RNA干扰

Construction of shRNA expression vector targetting survivin and research on its biologic effect
XIE Fu-Hua,WU Xiao-Yun,WANG Run-Xiu,XIONG-Liang,LIANG Nian-Ci.Construction of shRNA expression vector targetting survivin and research on its biologic effect[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2008,29(12):1104-1107.
Authors:XIE Fu-Hua  WU Xiao-Yun  WANG Run-Xiu  XIONG-Liang  LIANG Nian-Ci
Abstract:
Keywords:survivin  shRNA
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