同型半胱氨酸对颈动脉平滑肌细胞增殖和氧化及基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的 观察同型半胱氨酸(Hcy)对兔颈动脉平滑肌细胞氧化损伤、增殖,及对基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响,进而从细胞及分子水平探讨Hcy引起动脉粥样硬化(AS)的发病机制.方法 采用不同剂量高蛋氨酸饲料饲喂新西兰大白兔,用HE染色法观察颈动脉增生.分离兔颈动脉平滑肌用胰消化酶处理后进行原代细胞及传代细胞培养.用黄嘌呤氧化法比色测定细胞内超氧化物歧化酶(SOD)的活力.用可见光比色法测定细胞内过氧化氢(CAT)的活力.免疫印迹法检测MMP-9蛋白的表达.用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测MMP-9 mRNA的表达.结果 光镜下可见高蛋氨酸饮食组局部颈动脉内膜损伤,内皮细胞坏死脱落,中膜平滑肌细胞排列紊乱,内膜下可见泡沫细胞.在高蛋氨酸饮食作用下,颈动脉平滑肌细胞内CAT、SOD 的活力明显增高;免疫印迹法结果显示,随着蛋氨酸含量的增加,各组动物颈动脉平滑肌细胞内MMP-9的蛋白量亦逐渐增高,差异有统计学意义(P＜0.05).经RT-PCR扩增,高蛋氨酸饮食组MMP-9 mRNA表达量增加.结论 高Hcy可加速动脉血管平滑肌细胞的增殖,并可能在一定剂量范围内造成动脉血管平滑肌细胞的超氧化损害增加,造成MMP-9高表达,使机体AS的进程加速.

Effect of Homocysteic Acid on Proliferation and Oxidation of Carotid Arterial Smooth Muscle Cells and Expression of Matrix Metalloproteinase-9