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TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测外周血单个核细胞TRAIL-mRNA
引用本文:毛丽萍,王惠民,张子玉,吴月平,章幼奕,鞠少卿,陈育凤.TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测外周血单个核细胞TRAIL-mRNA[J].临床检验杂志,2007,25(3):207-209.
作者姓名:毛丽萍  王惠民  张子玉  吴月平  章幼奕  鞠少卿  陈育凤
作者单位:1. 南通大学附属南通第三医院检验科,江苏南通226006
2. 南通大学附属医院检验科,南通,226001
基金项目:江苏省南通市社会发展基金资助课题(S2006043).
摘    要:目的 建立TaqMan实时荧光定量RT-PCR(rQ-RT-PCR)检测外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)mRNA含量的方法,探讨PBMC中TRAIL mRNA的检测价值.方法 在TRAIL基因第二和第三外显子区设计特异性引物和荧光探针,用RT-PCR扩增目的片段,实时检测产物的荧光强度,以标准品建立标准曲线,软件自动计算出待测样本中TRAIL mRNA含量,以TRAIL mRNA和β2M mRNA含量的对数比值进行TRAIL mRNA表达水平评价.结果 TRAIL mRNA含量线性范围为(2.9×10^3~2.9×10^9)copies/ml,批内和批间变异系数分别为9.5%和16.7%.30例健康献血员和58例慢性乙肝患者TRAIL mRNA与β2M mRNA浓度的对数比值的(x)±s分别为0.528±0.014和0.775±0.038,两组差异显著,P<0.001.结论 FQ-RT-PCR检测TRAIL mRNA水平具有较好的灵敏度和重复性,适用于临床研究.

关 键 词:肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体  单个核细胞  实时荧光定量RT-PCR
文章编号:1001-764X(2007)03-0207-03
收稿时间:2006/9/18 0:00:00
修稿时间:2006-09-182007-03-02

Detection of TRAIL mRNA of mononuclear cell in peripheral blood by TaqMan real-time fluorescence quantitative RT-PCR
MAO Liping,WANG Huimin,ZHANG Ziyu,WU Yueping,ZHANG Youyi,JU Shaoqing,CHENG Yuefeng.Detection of TRAIL mRNA of mononuclear cell in peripheral blood by TaqMan real-time fluorescence quantitative RT-PCR[J].Chinese Journal of Clinical Laboratory Science,2007,25(3):207-209.
Authors:MAO Liping  WANG Huimin  ZHANG Ziyu  WU Yueping  ZHANG Youyi  JU Shaoqing  CHENG Yuefeng
Institution:1. Department of Laboratory, Nantong No. 3 Hospital Affiliated to Nantong University, Nantong 226006 ;2. Department of Laboratory, Affiliated Hospital of Nantong University, Nantong 226001, China
Abstract:
Keywords:TRAIL mRNA  PBMC  FQ-RT-PCR
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