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基于Akt/ERK探讨丹蒌片对主动脉平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响
作者姓名:司春婴  王贺  孙文博  刘俊呈  陈玉善  解金红  关怀敏
作者单位:河南中医药大学第一临床医学院 郑州450000;河南中医药大学第一附属医院心脏中心 郑州450000;河南中医药大学第一附属医院心脏中心 郑州450000;河南中医药大学第一临床医学院 郑州450000
基金项目:国家自然科学基金委员会面上项目(81273949):丹蒌片促进兔髂动脉粥样硬化药物涂层支架置入后在内皮化的调控机制研究;负责人:关怀敏;国家自然科学基金委员会面上项目(81473507):化痰活血解毒方通过MAPKs信号通路抑制支架内新生动脉粥样硬化形成的机制研究;负责人:关怀敏。河南省科技攻关项目(182102310093):小檗碱联合姜黄素对ACS患者单核-巨噬细胞极化能力及分型的影响;负责人:陈玉善
摘    要:目的 观察丹蒌片对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)诱导的兔主动脉血管平滑肌细胞(rabbit aortic smooth muscle cell,RASMC)增殖、迁移和凋亡的影响,并探讨其与Akt及ERK信号通路的关系。方法 培养RASMC,建立Hcy诱导RASMC增殖模型,实验分为空白组、Hcy组、丹蒌片组、瑞舒伐他汀组(即可定组)、丹蒌片联合瑞舒伐他汀组(即混合组),后三组分别给于丹蒌片、瑞舒伐他汀及丹蒌片联合瑞舒伐他汀含药血清。作用24 h后,Cell Titer-Glo法测细胞增殖,Transwell法测细胞迁移,流式细胞仪Annexin V/PI双染法测细胞凋亡率,蛋白印迹法(Western blot)测信号通路相关蛋白Akt和ERK总蛋白及磷酸化蛋白表达量。结果 ①与空白组相比,Hcy组细胞增殖和迁移显著增加(P < 0.01),凋亡率显著降低(P < 0.01);与Hcy组相比,三种含药血清组细胞增殖和迁移明显减少(P < 0.01),凋亡率明显增加(P < 0.01);其中混合组增殖和迁移较丹蒌片组和可定组明显降低(P < 0.01),凋亡率更高(P < 0.01);与可定组比,丹蒌片组增殖略高,但差异均无统计学意义(P > 0.05),丹蒌片组细胞迁移数明显多于可定组(P < 0.05),凋亡率明显低于可定组(P < 0.05)。②各组Akt及ERK总蛋白表达水平无明显变化(P > 0.05);与空白组比较,Hcy组p-Akt及p-ERK蛋白表达量均显著上调(P < 0.01);与Hcy组相比,三种含药血清组p-Akt及p-ERK蛋白表达量明显下调(P < 0.01);其中混合组的p-Akt及p-ERK蛋白表达较丹蒌片组和可定组进一步下降(P < 0.01);与可定组比,丹蒌片组p-Akt及p-ERK蛋白表达量增加,但差异无统计学意义(P > 0.05)。结论 丹蒌片可拮抗Hcy诱导的兔动脉血管平滑肌细胞增殖和迁移,促进其凋亡,其作用可能与上调p-Akt及p-ERK信号通路蛋白有关。

关 键 词:血管平滑肌细胞  增殖  迁移  凋亡  支架内再狭窄  丹蒌片
收稿时间:2019-09-22
修稿时间:2020-06-19
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