miR-221对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞凋亡的作用机制

目的：研究miR-221对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)凋亡的影响,并探讨其作用机制。

方法：用葡萄糖30mmol/L处理HRCECs 48h建立高糖诱导的HRCECs细胞; 将HG+miR-NC组(转染miR-NC)、HG+miR-221组(转染miR-221 mimics)、HG+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、HG+anti-miR-221组(转染anti-miR-221)、HG+miR-221+pcDNA 3.1组(共转染miR-221 mimics和pcDNA 3.1)、HG+miR-221+pcDNA 3.1-MDM2组(共转染miR-221 mimics和pcDNA 3.1-MDM2),用脂质体法转染至HRCECs细胞,再进行高糖处理; qRT-PCR法检测细胞中miR-221、p53、MDM2的表达; Western blot检测细胞中p53、MDM2的蛋白表达; 流式细胞术检测细胞的凋亡。

结果：与NG组相比,高糖诱导的HRCECs细胞中miR-221、p53的表达显著升高,MDM2的表达显著降低,细胞凋亡率显著升高; 过表达miR-221可使高糖诱导的HRCECs细胞的凋亡率升高更明显,抑制miR-221可下调高糖诱导的HRCECs细胞的凋亡并下调p53,上调MDM2; 过表达MDM2则可逆转抑制miR-221对高糖诱导的HRCECs细胞的抗凋亡作用及对p53、MDM2的调控。

结论：miR-221可促进高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞凋亡,其机制与p53/MDM2信号通路有关。