| 颠茄AbCYP80F1基因的克隆与功能分析 |
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| 引用本文： | 付维,郑涛,姜育松,康健,张明生,苟光前,强玮. 颠茄AbCYP80F1基因的克隆与功能分析[J]. 中草药, 2020, 51(16): 4291-4299 |
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| 作者姓名： | 付维 郑涛 姜育松 康健 张明生 苟光前 强玮 |
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| 作者单位： | 贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院, 山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室, 山地生态与农业生物工程协同创新中心, 贵州 贵阳 550025 |
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| 基金项目： | 贵州省生物学一流学科建设项目（GNYL[2017]009）；国家重点研发计划课题（2016YFC0502604）；贵州省科技计划重大专项课题（黔科合平台人才[2017]5411-06）；贵州大学引进人才科研项目（贵大人基合字[2017]58） |
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| 摘 要： | 目的克隆颠茄Ab CYP80F1基因和启动子序列,分析启动子上与调控信号和转录因子相关的调控元件,研究Ab CYP80F1基因超表达对颠茄发根中东莨菪碱积累的影响。方法以莨菪CYP80F1为探针,在颠茄转录组中进行Blastn检索获得同源的unigene。采用RACE技术克隆Ab CYP80F1全长,热不对称PCR技术克隆启动子序列,发根农杆菌浸染法获得超表达AbCYP80F1基因的颠茄发根,对培养的发根中东莨菪碱含量进行HPLC分析。结果克隆得到1 675 bp的全长Ab CYP80F1基因,其编码蛋白与铃铛子的CYP80F1亲缘关系最近。基因上游2 000 bp启动子上包含的顺式作用元件涉及光、无氧、生长素、茉莉酸、赤霉素和低温信号响应,同时包含有MYB、AP2/ERF、WRKY和bHLH转录因子的识别位点。超表达Ab CYP80F1基因使颠茄发根中东莨菪碱含量平均提高了1.8倍。结论 AbCYP80F1是颠茄须根特异性表达的合成途径基因,超表达能提高终产物东莨菪碱含量,Ab CYP80F1可能受到WRKY和bHLH转录因子的调控。
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| 关 键 词： | 颠茄 AbCYP80F1 东莨菪碱 启动子分析 RACE技术 |
| 收稿时间： | 2020-01-09 |
Cloning and functional analysis of AbCYP80F1 gene in Atropa belladonna |
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| FU Wei,ZHENG Tao,JIANG Yu-song,Kang Jian,ZHANG Ming-sheng,GOU Guang-qian,QIANG Wei. Cloning and functional analysis of AbCYP80F1 gene in Atropa belladonna[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs, 2020, 51(16): 4291-4299 |
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| Authors: | FU Wei ZHENG Tao JIANG Yu-song Kang Jian ZHANG Ming-sheng GOU Guang-qian QIANG Wei |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Plant Resource Conservation and Germplasm Innovation in Mountainous Region(Ministry of Education), Collaborative Innovation Center for Mountain Ecology & Agro-Bioengineering(CICMEAB), College of Life Sciences/Institute of Agro-bioengineering, Guizhou University, Guiyang 550025, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Atropa belladonna L. AbCYP80F1 scopolamine promoter analysis RACE |
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